[发明专利]一种含肼基的磁靶向药物载体的制备方法

权利要求书

1.一种含肼基的磁靶向药物载体的制备方法，其特征在于：

使用的化学物质材料为：磁性有序介孔碳纳米球、N-(β-氨乙基)-γ-氨丙基三甲氧基硅烷、对肼基苯甲酸、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺、N-羟基琥珀酰亚胺、冰乙酸、盐酸阿霉素、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、氯化钠、无水乙醇、去离子水、氮气，其组合准备用量如下：以克、毫升、厘米³为计量单位

制备方法如下：

(1)制备氨基化修饰的磁性有序介孔碳纳米球

①将磁性有序介孔碳纳米球0.3g±0.0001g、N-(β-氨乙基)-γ-氨丙基三甲氧基硅烷2mL±0.0001mL、无水乙醇40mL±0.0001mL、去离子水20mL±0.0001mL、冰乙酸2mL±0.0001mL加入三口烧瓶中；

②将三口烧瓶置于超声分散仪中进行超声分散，超声波频率60KHz，超声分散时间10min；

③分散均匀后，将三口烧瓶置于电热搅拌器上，加热温度65℃±1℃、氮气保护下反应4h，氮气输入速度为30cm³/min，反应式如下：

式中：

Fe₃O₄-C-C₇H₁₉N₂O₃Si：氨基化修饰的磁性有序介孔碳纳米球

CH₃OH：甲醇

④反应结束后，停止加热，反应液随三口烧瓶冷却至25℃；

⑤磁铁分离，利用磁力线强度为0.24T的磁铁对反应液进行磁性分离，弃去废液，收集磁性物质；

⑥用无水乙醇30mL和去离子水30mL的混合溶液对收集的磁性物质进行洗涤，以除去未反应的N-(β-氨乙基)-γ-氨丙基三甲氧基硅烷；

⑦真空干燥，将磁性物质置于真空干燥箱中，干燥温度60℃，干燥时间12h，真空度2Pa，干燥后得：氨基化修饰的磁性有序介孔碳纳米球；

(2)氨基化修饰的磁性有序介孔碳纳米球的表面接枝

①配制磷酸盐缓冲溶液，称取磷酸二氢钠0.2g±0.0001g、磷酸氢二钠2.2g±0.0001g、氯化钠8.5g±0.0001g，量取去离子水1000mL±0.0001mL，加入烧杯中，搅拌30min，成0.01mol/L的磷酸盐缓冲溶液，pH值为7.4；

②称取对肼基苯甲酸0.023g±0.0001g、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺0.029g±0.0001g、N-羟基琥珀酰亚胺0.026g±0.0001g溶于磷酸盐缓冲溶液10mL±0.0001mL中，配制成混合溶液，将混合溶液置于密闭瓶中，将密闭瓶置于恒温摇床中，在25℃、180rpm下搅动60min；

③反应后，将氨基化修饰的磁性有序介孔碳纳米球0.01g±0.0001g加入混合溶液中，继续避光搅拌12h；

④抽滤、洗涤，将混合液置于抽滤瓶的布什漏斗中，用三层中速定性滤纸进行抽滤，留存滤饼，弃去废液，然后用去离子水进行洗涤，以除去未参与反应的对肼基苯甲酸、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺，抽滤、洗涤重复进行3次；

⑤真空干燥，将滤饼置于石英容器中，然后置于真空干燥箱中干燥，干燥温度60℃，干燥时间12h，真空度2Pa，得含肼基的磁靶向药物载体；

(3)研磨、过筛

将含肼基的磁靶向药物载体用玛瑙研钵、研棒进行研磨，然后用600目筛网过筛；

研磨、过筛反复进行；

得：含肼基的磁靶向药物载体；

(4)检测、分析、表征

对制备的含肼基的磁靶向药物载体的形貌、结构、成分、化学物理性能、载药释药性能进行检测、分析、表征；

用扫描电子显微镜进行微观形貌分析；

用X射线衍射仪进行晶相分析；

用红外光谱仪进行表面官能团分析；

用紫外-可见分光光度计进行药物的上载和释放性能分析；

结论：含肼基的磁靶向药物载体为黑色粉体颗粒，颗粒直径≤100nm，产物纯度99.8％，有明显的磁响应性，可以达到靶向输送药物的目的，最大载药量为529.18mg/g，颗粒对盐酸阿霉素具有明显的pH控释性能，释药率随着pH值变化而变化；

(5)产物储存

将制备的含肼基的磁靶向药物载体储存于棕色透明的玻璃容器中，密闭避光保存，置于干燥、洁净环境，要防水、防晒、防酸碱盐腐蚀，存储温度20℃，相对湿度10％。

2.根据权利要求1所述的一种含肼基的磁靶向药物载体的制备方法，其特征在于：

氨基化修饰的磁性有序介孔碳纳米球的制备是在三口烧瓶中进行的，是在电加热控制、磁子搅拌、水循环冷凝、氮气保护下完成的；

电加热器(1)为立式，电加热器(1)下部为电加热座(2)、上部置放三口烧瓶(3)；在三口烧瓶(3)上部设有氮气管(4)、加液漏斗(5)及控制阀(6)、水循环冷凝管(7)及进水口(8)、出水口(9)、出气口(10)；三口烧瓶(3)内底部置放磁子搅拌器(11)；三口烧瓶内盛放混合液(12)、氮气(15)；在电加热器(1)左部设有氮气瓶(13)，氮气瓶(13)上部设有氮气阀(14)、氮气管(4)，并向三口烧瓶内输入氮气(15)；在电加热座(2)上设有显示屏(16)、指示灯(17)、电源开关(18)、加热温度控制器(19)、加热时间控制器(20)。