[发明专利]一种新型乳酸片球菌及其应用有效
申请号: | 201710367900.3 | 申请日: | 2017-05-23 |
公开(公告)号: | CN107034163B | 公开(公告)日: | 2020-03-10 |
发明(设计)人: | 刘辉;季海峰;张董燕;王四新;王晶;张伟;王雅民 | 申请(专利权)人: | 北京市农林科学院 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N1/04;A23K10/18;A23K50/30;C12R1/01 |
代理公司: | 北京智为时代知识产权代理事务所(普通合伙) 11498 | 代理人: | 王加岭;杨静 |
地址: | 100097 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 新型 乳酸 球菌 及其 应用 | ||
1.一种乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)菌株ZPA017,其保藏号为CGMCCNo.9040。
2.一种猪源乳酸片球菌制剂,其特征在于,含有如权利要求1所述的乳酸片球菌ZPA017。
3.一种饲料添加剂,其特征在于,含有如权利要求2所述的猪源乳酸片球菌制剂。
4.一种猪源乳酸片球菌制剂的制备方法,其特征在于,在液体发酵培养基中发酵权利要求1所述的乳酸片球菌ZPA017,得到发酵液,将所述发酵液进行离心、乳化冻干,制备成的冻干粉为猪源乳酸片球菌制剂。
5.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,具体包括如下步骤:
(1)发酵培养:以1%的接种量将所述乳酸片球菌ZPA017接种于MRS液体培养基中,37℃培养24小时,如此活化2代后得到种子培养物;
将种子培养物以5%的接种量接种于装有液体培养基的发酵罐中,设定温度37℃、转速100rpm,维持恒定pH 4.8,当发酵至16小时时开始补料,之后每隔2小时进行一次,共补料5次;
当发酵液pH不再降低时,终止发酵,得到发酵液;
(2)发酵液离心:将所述步骤(1)得到的发酵液在19000rpm离心,得到菌泥;
(3)乳化冻干:将所述步骤(2)得到的菌泥与1/3所述发酵液体积的冻干保护剂混合,高剪切分散乳化机3000r/min乳化30min,分装于冷冻盘中,厚度2cm左右,预冻3小时,设置真空冷冻干燥机冷凝温度-60℃、真空度17Pa,冻干24小时后,即得乳酸片球菌制剂。
6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,
所述的液体培养基由如下浓度的物质组成:葡萄糖15g/L,蛋白胨5g/L,牛肉膏5g/L,乙酸钠5g/L,酵母浸粉2.5g/L,K2HPO4·3H2O 2g/L,柠檬酸氢二铵2g/L,MgSO4·7H2O 0.58g/L,MnSO4 0.19g/L,吐温-80 1ml/L,pH 6.5;
所述补料液为葡萄糖溶液,浓度为500g/L;
所述冻干保护剂为含有质量百分比浓度分别为8%的海藻糖、16%的脱脂乳、1.5%的L-半胱氨酸、4%的乳糖、1%的谷氨酸钠、0.5%的L-赖氨酸、5%的糊精和1%的甘油。
7.权利要求2所述乳酸片球菌制剂作为添加剂在饲料中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述饲料为猪饲料。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,所述饲料为仔猪饲料。
10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于,在基础日粮中添加所述乳酸片球菌制剂,使所述乳酸片球菌在每千克全价仔猪料中的活菌数为1.2×108CFU。
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