[发明专利]一种增加γ-聚谷氨酸发酵液溶氧的方法

权利要求书

1.一株解淀粉芽孢杆菌，Bacillus amyloliquefaciens JX-6，其特征在于：其保藏编号为：CGMCC No.13715，该菌在LB培养基中的营养细胞为杆状，革兰氏阳性，长2～3μm、宽0.7～0.9μm；其菌落在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上平板培养为表面凸起，光滑无褶皱，菌落透明，边缘呈规则圆形，菌落粘性大，挑起有丝状。

2.一种增加γ-聚谷氨酸发酵液溶氧的方法，其特征在于：包括如下步骤：将解淀粉芽孢杆菌JX-6接种于已灭菌的斜面活化培养基，经活化培养得到活化菌种；将所述活化菌种接种于已灭菌冷却的种子培养基中，经种子液培养得到种子液；将所述种子液接种在发酵培养基中，发酵过程中添加固态氧，发酵完成后得到发酵液；对所述发酵液进行提取、纯化、透析除盐、冷冻干燥制得含γ-聚谷氨酸的成品；所述固态氧为Na₂CO₄和CaO₂中的一种或两者的混合物。

3. 根据权利要求2所述的增加γ-聚谷氨酸发酵液溶氧的方法，其特征在于：所述的斜面活化培养基由蛋白胨10 g/L，牛肉膏5 g/L，NaCl 5 g/L和水组成，pH 7.0～7.4；所述的活化培养为30～37℃培养24～48h。

4. 根据权利要求2所述的增加γ-聚谷氨酸发酵液溶氧的方法，其特征在于：所述的种子培养基由蛋白胨 10 g/L，牛肉膏 5 g/L，NaCl 5 g/L和水组成，pH 7.0～7.4；所述的种子液培养为30～37℃摇瓶培养24～48h。

5. 根据权利要求2所述的增加γ-聚谷氨酸发酵液溶氧的方法，其特征在于：所述的发酵培养基为E型培养基：由柠檬酸 10 g/L，谷氨酸 20 g/L，硫酸铵 10 g/L，甘油 80 g/L，K₂HPO₄ 1 g/L，MgSO₄·7H₂O 0.5 g/L，FeCl₃·6H₂O 0.02 g/L，MnSO₄·H₂O 0.1 g/L，CaCl₂0.2 g/L和水组成，pH 7.0。

6.根据权利要求5所述的增加γ-聚谷氨酸发酵液溶氧的方法，其特征在于：所述的发酵过程中，将所述种子液按体积分数2%～10%接种量接种于发酵培养基中，在30～37℃摇瓶培养24～48h；然后将固态氧以溶液状态加入培养基中，添加至固态氧在发酵液中的浓度为50～500μmol/L，继续摇瓶培养至96h，终止发酵。

7.根据权利要求6所述的增加γ-聚谷氨酸发酵液溶氧的方法，其特征在于：所述的固态氧在发酵液中的浓度为200～400μmol/L。

8.根据权利要求2所述的增加γ-聚谷氨酸发酵液溶氧的方法，其特征在于：所述的提取是用硫酸调节发酵液pH至3.0，于4800r/min下离心30min去除菌体；所述的纯化是向提取的上清液中加入3倍体积的预冷无水乙醇，4℃静置过夜，离心得γ-聚谷氨酸粗品沉淀；所述的透析除盐是用适量的去离子水溶解粗品，调节pH值为3～4，用透析袋进行脱盐；所述的冷冻干燥是对透析液进行真空冷冻干燥。