[发明专利]一种检测伊氏锥虫的引物对及其检测方法和试剂盒

权利要求书

1.一种检测伊氏锥虫的引物对，其特征在于，包含上下游引物PAG3-F和PAG3-R，序列分别如SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示。

2.权利要求1所述引物对在检测和/或鉴定伊氏锥虫中的应用。

3.权利要去1所述引物对在制备伊氏锥虫检测试剂或试剂盒中的应用。

4.一种检测伊氏锥虫的方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1.提取待测样品DNA或血液溶解液；

S2.以步骤S1所述DNA或血液溶解液为模板，利用权利要求1所述引物对进行PCR扩增反应；

S3.将扩增产物电泳检测，若扩增出单一250bp大小的条带，则待测样品中含有伊氏锥虫，反之则待测样品中没有伊氏锥虫。

5.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于，所述PCR扩增反应体系为：引物PAG3-F和引物PAG3-R，100 ng 样品DNA或5 μL样品血液溶解液，2.5 Units EasyTaq DNA polymerase，1×Easy Taq Buffer，0.2 mM dNTPs、灭菌双蒸水补齐至25 μL，引物PAG3-F和引物PAG3-R在反应体系中的终浓度分别为0.2 μM。

6.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于，所述PCR扩增反应条件为：94℃ 3 min；94℃30 s，65℃10 s，共30个反应循环。

7.权利要求4～6任一项所述方法在检测和/或鉴定伊氏锥虫中的应用。

8.权利要求4～6任一项所述方法在制备伊氏锥虫检测试剂盒中的应用。

9.一种检测和/或鉴定伊氏锥虫的试剂盒，其特征在于，含有权利要求1所述引物对。

10.根据权利要求9所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还含有PCR扩增反应所需的试剂。