[发明专利]一种检测奥希替尼含量和有关物质的高效液相法

说明书

本发明涉及一种药物分析领域，具体涉及一种检测奥希替尼含量和有关物质的高效液相色谱法。色谱条件是采用美国Agilent高效液相色谱仪，Agilent Eclipse Plus色谱柱C₁₈(250×4.6mm 5μm)，流动相以乙腈‑磷酸缓冲液(6.8gKH₂PO₄溶解于1L水中，H₃PO₄调pH＝2.8)＝27:73，检测波长为272nm，流速为1ml/min，进样量为5μl。该检测方法准确可靠、色谱峰分离效果好，能高效检测奥希替尼含量和有关物质。

技术领域

本发明涉及一种检测奥希替尼含量及有关物质的高效液相色谱法，属于药物分析领域。

技术背景

奥希替尼(结构式见附图1)分子式：C₂₈H₃₃N₇O₂·CH₄O₃S，黄色结晶性粉末。用于治疗EGFR T790M突变阳性的局部晚期或转移性非小细胞肺癌的靶向药物。它是一种口服的激酶抑制剂，用于既往经表皮生长因子受体(EGFR)酪氨酸激酶抑制剂(TKI)治疗时或治疗后出现的疾病进展，并且经检测确认存在EGFR T790M突变阳性的局部晚期或转移性非小细胞性肺癌(NSCLC)成人患者的治疗，并有研究在肺癌脑转移中具有显著治疗。在我国，每年新发病的肺癌患者超过73万人，是发病率和死亡率最高的恶性肿瘤。目前关于检测奥西替尼含量和有关物质方面没有研究。就此本发明采用高效液相法检测奥西替尼的含量和有关物质，以乙腈-磷酸缓冲液(6.8gKH₂PO₄溶解于1L水中，H₃PO₄调pH＝2.8)为流动相，等度洗脱。该检测方法简便高效，色谱峰分离度很好，分离度大于1.5，符合中国药典2010版检测标准，并且色谱峰无拖尾无前延现象，拖尾因子T＝1.12，符合中国药典2010版规定拖尾因子0.95～1.05。所以该检测方法在奥希替尼含量控制和杂质分析具有重要的应用价值。

发明内容

本发明经多次精密试验提供一种更准确、高效的测定奥希替尼含量和有关物质的高效液相色谱法。为了达到目的，本发明用了如下技术方案:

本发明的一个具体实施例中，本发明采用Agilent高效液相色谱仪测定奥希替尼的含量和有关物质，以乙腈-磷酸缓冲液(6.8gKH₂PO₄溶解于1L水中，H₃PO₄调pH＝2.8)为流动相进行等度洗脱，并且经过多次实验验证，流动相比例优选27:73。

本发明又一个具体实施例中，本发明提供Agilent Eclipse Plus十八烷基键合硅胶色谱柱或者效能相当的色谱柱，经过多次实验验证，本发明优选Agilent Eclipse Plus色谱柱，其分析色谱峰形较好，无拖尾峰无前延峰。

本发明另一个具体实施例中，十八烷基键合硅胶色谱填料颗粒为3-5μm，优选5μm，色谱柱的长度为150mm或250mm，优选250mm。

本发明再一个具体实施例中，利用DAD检测器进行190nm-400nm全波长扫描，结果奥希替尼在212nm、272nm、374nm处有最大吸收，且奥希替尼的有关物质在272nm波长下也有较好的吸收，因此优选272nm作为奥希替尼含量和有关物质测定的检测波长。

本发明再一个具体实施例中，利用标准品溶液多次进样来确定进样量，进样精密度次数为5次，所得最佳进样量为5μl。

本发明还有一个具体实施例中，所述流动相的流速为0.5～1.2ml/min，优选1ml/min。

本发明提供一种HPLC法测定奥希替尼含量和有关物质的方法，其步骤如下：