[发明专利]一种药物纳米制剂及其制备方法

说明书

本发明公开了一种药物纳米制剂及其制备方法。该药物纳米制剂包括纳米载体，所述纳米载体为由亲水外链和疏水内核组成的核壳结构所述亲水外链为水溶性聚合物或水溶性多糖；所述疏水内核为聚酰胺‑胺，其表面吸附有siRNA，内部包埋有抗肿瘤药物和疏水性探针；所述亲水外链与疏水内核通过偶氮苯‑4，4‑二羧酸连接。本发明首次采用偶氮苯‑4，4‑二羧酸(AZO)连接甲氧基聚乙二醇胺(PEG)与聚酰胺‑胺(PAMAM)制备了一种低氧响应性的纳米载体，可用于共载化疗药物和siRNA；该纳米制剂不仅在肿瘤低氧微环境刺激下粒径减小，穿透性强；而且制剂工艺简单，对肿瘤细胞的毒性增加。

技术领域

本发明涉及纳米载药制剂的制备领域，尤其涉及一种药物纳米制剂及其制备方法。

背景技术

癌症是引起人类死亡的第二大原因，肿瘤发病率和死亡率居高不下，使其成为医疗领域的重大挑战之一。化疗仍然是目前最主要的肿瘤治疗手段，但传统的标准化疗往往会产生多种不可避免的副反应及系统毒性。纳米传递系统的出现提高了药物对肿瘤部位的靶向性，使得药物更多得聚集于肿瘤部位，从而大大降低了对其他正常组织器官的毒副作用。目前已有多个抗肿瘤纳米制剂问世，比如Doxil和Abraxane。

现有技术中，关于抗肿瘤纳米制剂的研究较多。利用肿瘤微环境内低氧、偏酸、高压等特点设计纳米给药系统是当前的热点。如Zhu等合成的MMP2敏感脂质体可携载多柔吡星(DOX)治疗乳腺癌。Cheng等将MMP2敏感穿透肽(R9GPLGLAGE8,ACPP)与原卟啉结合形成胶束用于光动力学治疗。在成像方面，Yaping Wang等制备的高效低毒纳米探针可用于探测MMP2高表达的细胞和肿瘤。

然而，在肿瘤部位，细胞外基质更加致密、血管异常化、组织间隙液压增高，受这些因素影响，纳米粒子通常只能被动地聚集在疏漏的肿瘤血管周围，而不能渗透整个肿瘤组织。同时，绝大部分实体瘤都存在的低氧特性造成肿瘤细胞的转录因子HIF1alpha表达水平过高，这是导致肿瘤产生化学耐药的重要原因之一。

目前的传统纳米制剂并不能很好地解决上述这两个问题。因此，构建一个具有肿瘤靶向性并可穿透进入肿瘤内部克服肿瘤低氧耐药问题的药物递送系统十分重要。

发明内容

本发明的目的在于针对现有纳米制剂难以渗透进入肿瘤内部及克服肿瘤耐药问题的不足，提供了一种药物纳米制剂及其应用，该药物纳米制剂是一种可共载化疗药物和siRNA的纳米载体，其在肿瘤低氧微环境刺激下粒径减小进而促进穿透，进入肿瘤内部，提高对肿瘤细胞的毒性。

一种药物纳米制剂，包括纳米载体，所述纳米载体为由亲水外链和疏水内核组成的核壳结构，所述亲水外链为水溶性聚合物或水溶性多糖；所述疏水内核为聚酰胺-胺，内部包埋有抗肿瘤药物；所述亲水外链与疏水内核通过偶氮苯-4，4-二羧酸连接。

上述聚酰胺-胺是一种表面带大量正电的树状大分子物质，能够与低氧刺激响应性小分子偶氮苯-4，4-二羧酸通过酰胺键连接；其表面正电荷能够吸附带负电的核酸。

本发明制备的药物纳米制剂(简称：纳米制剂)中的纳米载体为亲水性外链包裹疏水性内核的壳核式结构，疏水性内核可大量包埋疏水性药物，而带正电性的疏水内核易吸附负电的核酸。纳米载体利用亲水性外壳在体内长循环并通过EPR效应聚集于肿瘤部位后，在肿瘤低氧还原的微环境下，偶氮苯-4，4-二羧酸的偶氮双键断裂，纳米粒子的亲水性外壳脱去，暴露出携载药物和核酸的表面阳离子的小粒径树状大分子，渗透进入肿瘤组织内部细胞，并在溶酶体内发生质子化效应，逃逸进入细胞浆，同时释放抗肿瘤药物和核酸。其中，功能性核酸可用于抑制耐药基因的表达，从而联合药物杀伤低氧条件下的耐药细胞，同时利用该纳米载体携载功能性探针可有效实时反馈药效。

所述的亲水外链可以为水溶性聚合物，如甲氧基聚乙二醇胺(mPEG-NH₂)；或者水溶性多糖，如透明质酸(Hyaluronan,HA)，肝素，葡聚糖，海藻酸钠等。