[发明专利]一种提高低温保存后毛桐种子胚活力的方法

说明书

一种提高低温保存后毛桐种子胚活力的方法，包括：将‑18℃至‑20℃低温保存的干燥种子连同存放种子的密闭容器取出；在温度为15℃、相对湿度15％的环境中放置24小时，取出种子；将种子放置在温度为45℃的培养箱中，热处理6小时后取出。种子恢复到室温后放置于1％的琼脂培养基上，置于20℃培养间24小时；处理后的种子切破种皮及胚乳，浸泡于1％的氯化三苯基四氮唑(TTC)溶液中，放置于30℃黑暗条件下48小时；取出浸泡后的种子切开观测胚染色情况，具有活力的胚显示均匀的红色。该方法显著提高了不同产地，低温下储存不同时间的毛桐种子的胚活力。解决了毛桐种子低温保藏后胚活力降低的问题。且处理方法简便易行，无任何危险性及毒副作用。

技术领域

本发明属于植物种质资源保存技术领域，具体地，涉及一种提高低温(-18℃至-20℃)保存后毛桐种子胚活力的方法。

背景技术

毛桐(Mallotus barbatus(Wall.)Muell.Arg.)是大戟科(Euphorbiaceae)野桐属(Mallotus Lour.)小乔木树种。分布于亚洲东部和南部各国。国内主要产于云南、四川、贵州、湖南、广东和广西等。生于海拔400-1 300米林缘或灌丛中。

茎皮纤维可作制纸原料；木材质地轻软，可制器具；种子油可作工业用油。目前未见毛桐种子萌发及储藏方面研究报道。

将正常型种子干燥后低温(-18℃至-20℃)保藏可以极大的延长其寿命，这在国际上已经形成共识，并且基于这一理论建立了多个农作物及野生植物种子库；但一些植物的种子在冷藏后胚的活力会发生变化，从而导致种子活力下降，影响库存质量。因此提高及改善低温冷藏后种子胚的活力对于长期高效保存及合理利用植物种质资源有着重要的意义。

目前对种子进行活力检测的方法主要有萌发及氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法(也叫TZ染色法)。在保存实践中本发明发现冷藏后毛桐种子几乎不能萌发，对其进行TTC染色后发现，只有少数种子的胚可以染色，几乎全部种子的胚乳均不能染色；结合该属其他类群(如白背叶、白楸及尼泊尔野桐，均另案报道)中的发现本发明判断可能是由于胚及胚乳在冷藏过程中发生某种变化而导致的活力下降，进而影响种子的整体活力及萌发率；为此发明了本发明的方法，用以提高胚的活力。对于该物种低温冷藏后的种子，目前尚无有效方法使其萌发，因此胚活力的评价采用TTC染色法。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术中在低温(-18℃至-20℃)保存一段时间后的毛桐种子胚活力大幅下降甚至几乎完全丧失的技术难题，提供一种简便高效提高低温保存后毛桐种子胚活力的方法。为实现该物种的长期有效保存及利用提供技术支持。

为了实现本发明的上述目的，本发明提供了如下的技术方案：

一种提高低温保存后毛桐种子胚活力的方法，包括如下步骤：

(1)将在-18℃至-20℃冷藏保存后的种子连同其密闭容器取出，在温度为15℃、相对湿度15％的环境中放置24小时回温；

(2)将回温后的种子从密闭容器中取出，放置在温度为45℃的培养箱中，热处理6小时后取出；

(3)将步骤(2)处理后的种子取出，待种子温度恢复到室温后放置于1％的琼脂培养基上，放置于20℃培养间24小时；

(4)将上述步骤(3)处理后的种子切破种皮及胚乳；

(5)将上述步骤(4)处理后的种子浸泡于1％的氯化三苯基四氮唑(TTC)溶液中，放置于30℃黑暗条件下48小时；

(6)将上述步骤(5)处理后的种子切开观测胚染色情况，具有活力的胚显示均匀的红色。