[发明专利]一种猪精液有效精子数的检测方法

权利要求书

1.一种猪精液有效精子数的检测方法，其特征在于操作步骤如下：

（1）准备计数板

在计数板的中部设有100个大小相同的计数池，所述计数池为小方格状，每个计数池的深度0.01mm、长和宽均为0. 1mm；

（2）检测准备

（2.1）将计数板放于显微镜载物台上，在计数板的底部设有恒温预热板，所述恒温预热板的温度为37℃；

（2.2）将一盖玻片平放于计数池上，用移液器吸取0.05毫升的待检精液，滴于盖玻片的边缘，利用液体的毛细虹吸作用使精液吸入计数池；

（3）显微镜观察成像

首先，用10×目镜和10×物镜进行显微观察，以便找到计数池位置，然后将物镜调至25倍，观察每个计数池中的精子数量；在250倍的放大显微镜下拍摄成像；

（4）计数

（4.1）统计对角线上连续4个计数池中的精子数，精子数的平均值，记作M；

（4.2）统计所述对角线上连续4个计数池中呈直线运动的运动精子数，运动精子数的平均值，记作X；

（5）统计分析精子密度、精子活力和有效精子数

精子密度（亿/ml）：M/10；

精子活力：X/M；

有效精子总量（亿）：（M/10）×V ×精子活力；

所述V为采集的猪精液总体积。

2.根据权利要求1所述的一种猪精液有效精子数的检测方法，其特征在于：所述待检精液为现采集的新鲜猪精液或稀释好的常温精液。

3.根据权利要求2所述的一种猪精液有效精子数的检测方法，其特征在于：每份稀释好的常温精液的体积为80毫升，有效精子数为25~40亿，保存温度17℃，保存时间为5天以内。