[发明专利]一种鉴定荞麦黑斑病抗性的方法

说明书

本发明涉及一种鉴定荞麦黑斑病抗性的方法，包括如下步骤：1)对健康的荞麦叶片表面用无菌水处理后，用针头刺伤所述叶片正面，将黑斑病病原菌的孢子悬浮液接种于所述针刺点，得接种叶片；2)将所述接种叶片在恒温条件下进行培养，培养完成后测量病斑的大小；3)将病斑的大小进行分级，根据所属的级别计算叶片的病情指数，进行抗性评价。本发明所述的方法操作简单，周期短，评价结果准确可靠，适于大规模地推广应用。

技术领域

本发明涉及农作物病虫害抗性鉴定领域，具体涉及一种荞麦黑斑病抗性鉴定方法。

背景技术

荞麦黑斑病是由链格孢(Alternaria alternata)引起的一种重要真菌病害，广泛分布于我国荞麦种植区，为害严重时发病率可高达65～80％。该病害主要侵染荞麦叶片，造成叶片枯黄、早衰，植株生长缓慢，导致产量和品质严重下降，给荞麦生产造成严重的经济损失。荞麦黑斑病的发生为害已成为目前严重影响我国荞麦高产、优质的主要因素之一。因此，科学有效防控荞麦黑斑病将已成为现阶段荞麦生产提质增效和持续稳定发展的关键。

利用抗病品种是防治荞麦黑斑病最经济有效的重要措施，而筛选抗病性荞麦种质资源是选育抗病性荞麦品种的基础。当前，国内尚无荞麦黑斑病抗性鉴定的方法及抗病性的荞麦种质资源，严重制约了荞麦黑斑病抗病性品种的选育，因此，当前研究建立荞麦黑斑病的抗性鉴定方法迫在眉睫。准确、稳定的荞麦黑斑病抗性鉴定方法，可为今后筛选抗病性荞麦种质资源筛选及抗病育种研究提供重要的技术保障，为有效防控荞麦黑斑病的奠定了重要的研究基础。

发明内容

本发明的目的是提供一种鉴定荞麦黑斑病抗性的方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)对健康的荞麦叶片表面用无菌水处理后，用针头刺伤所述叶片正面，将黑斑病病原菌的孢子悬浮液接种于所述针刺点，得接种叶片；

2)将所述接种叶片在恒温条件下进行培养，培养完成后测量病斑的大小；

3)根据病斑的大小，进行抗性鉴定。

优选的，所述荞麦叶片为荞麦植株4～5叶期的叶片。荞麦生育期较短(约90天)，在4～5叶期时荞麦叶片大小合适，比较适宜后期观察接种发病症状。

优选的，所述针刺的部位需避开所述叶片的叶脉。该病害主要在叶片上出现症状，且病斑主要在叶肉区域，因此接种时避开叶脉，更符合该病害的症状特征。

优选的，刺伤叶片的具体操作为用针头将所述叶片正面的叶肉部分刺伤。针刺的过程中注意仅刺伤不刺破。

优选的，所述黑斑病病原菌的孢子悬浮液的浓度为

1×10⁶CFU/ml。

优选的，所述孢子悬浮液的接种量为5μL。这个菌液浓度使病菌孢子的量达到一定程度，利于接种时孢子萌发侵染寄主；这种接接种量可足够覆盖针刺点。

优选的，所述接种叶片在光照培养箱内进行培养，培养温度为25℃±1℃，光照强度8000～10000lux，光照和黑暗每12h交替一次，4d后测量接种叶片的病斑大小。上述条件更接近植物自然生长条件，可最大限度地模拟自然环境条件。

优选的，所述步骤3)具体为：

A、根据病斑的大小划分发病等级

0级：无病斑，未发病；

1级：病斑直径为0.01～0.50mm；

3级：病斑直径为0.51～2.50mm；

5级：病斑直径为2.51～4.50mm；

7级：病斑直径为4.51～6.50mm；

9级：病斑直径≥6.51mm；