[发明专利]检测ADAMTS13基因全外显子的试剂盒和方法在审
申请号: | 201710187401.6 | 申请日: | 2017-03-27 |
公开(公告)号: | CN106868174A | 公开(公告)日: | 2017-06-20 |
发明(设计)人: | 李文静;刘赵玲;王淑一 | 申请(专利权)人: | 杭州艾迪康医学检验中心有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 浙江杭州金通专利事务所有限公司33100 | 代理人: | 黄素萍,徐关寿 |
地址: | 310030 浙江省杭州市西湖区振*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 adamts13 基因 全外显子 试剂盒 方法 | ||
1.检测ADAMTS13基因全外显子的试剂盒,其特征在于,包括:扩增覆盖检测ADAMTS13基因全外显子的正、反向引物,其碱基序列为:
2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,还包括一对测序引物M13-F和M13-R,其碱基序列为:
M13-F:TGTAAAACGACGGCCAGT
M13-R:AACAGCTATGACCATG。
3.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述26对正、反向引物的使用浓度比为:ADAMTS13-F:ADAMTS13-R=1:1。
4.一种检测ADAMTS13基因全外显子序列的方法,其包括如下步骤:
(1)提取样品DNA;
(2)利用26对扩增引物ADAMTS13-1F与ADAMTS13-1R;ADAMTS13-2F与ADAMTS13-2R;ADAMTS13-3F与ADAMTS13-3R;ADAMTS13-4F与ADAMTS13-4R;ADAMTS13-5-6F与ADAMTS13-5-6R;ADAMTS13-7F与ADAMTS13-7R;ADAMTS13-8F与ADAMTS13-8R;ADAMTS13-9F与ADAMTS13-9R;ADAMTS13-10-11F与ADAMTS13-10-11R;ADAMTS13-12F与ADAMTS13-12R;ADAMTS13-13F与ADAMTS13-13R;ADAMTS13-14F与ADAMTS13-14R;ADAMTS13-15F与ADAMTS13-15R;ADAMTS13-16F与ADAMTS13-16R;ADAMTS13-17-18F与ADAMTS13-17-18R;ADAMTS13-19F与ADAMTS13-19R;ADAMTS13-20F与ADAMTS13-20R;ADAMTS13-21F与ADAMTS13-21R;ADAMTS13-22F与ADAMTS13-22R;ADAMTS13-23F与ADAMTS13-23R;ADAMTS13-24F与ADAMTS13-24R;ADAMTS13-25F与ADAMTS13-25R;ADAMTS13-26F与ADAMTS13-26R;ADAMTS13-27F与ADAMTS13-27R;ADAMTS13-28F与ADAMTS13-28R;ADAMTS13-29F与ADAMTS13-29R对(1)中的DNA分别进行扩增,获得覆盖检测ADAMTS13基因全外显子的扩增产物;
(3)利用1对测序引物M13-F与M13-R对(2)中的扩增产物分别进行正向和反向测序,获得所述扩增产物的基因序列;
(4)将(3)中的基因序列与野生型ADAMTS13基因序列进行比较,确定突变位点是否存在。
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