[发明专利]UCNPs‑Ab1和GNRs‑Ab2及其制备方法、甲胎蛋白的检测方法

权利要求书

1.一种UCNPs-Ab₁的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：

1)将碱、水、油酸、C1-C3的醇、锰源、镱源、钇源、铒源和NaF进行搅拌，接着水热反应、离心分离得到OA-UCNPs(OA-NaYF₄:Yb，Er/Mn UCNPs)；

2)将OA-UCNPs分散于溶剂中，接着加入PAA(聚丙烯酸)水溶液进行配位体交换反应、离心分离得到PAA-UCNPs(羧基修饰的UCNPs)；

3)在EDC(碳二亚胺)和NHS(N-羟基琥珀酰亚胺)的存在下，将所述PAA-UCNPs分散于MES缓冲溶液(乙磺酸缓冲溶液)中并振荡孵育、分离和水洗，接着溶于PBS缓冲溶液，再加入抗体1二次振荡，随后加入BSA(牛血清白蛋白)三次振荡以封闭活性位点，离心水洗后得到UCNPs-Ab₁(NaYF₄:Yb，Er/Mn UCNPs-抗体1偶联体)。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其中，在步骤1)中，相对于0.3g的碱，所述水的用量为5-15mL，所述油酸的用量为2-8mL，所述醇的用量为5-15mL，所述锰源的用量为0.01-0.1g，所述钇源的用量为0.1-0.3g，所述镱源的用量为0.05-0.11g，所述铒源的用量为5-10mg，所述NaF用量为0.05-0.3g；

优选地，在步骤1)中，所述搅拌至少满足以下条件：搅拌温度为15-35℃，搅拌时间为5-20min；

更优选地，在步骤1)中，所述接触反应至少满足以下条件：反应温度为180-220℃，反应时间为6-10h；

进一步优选地，所述铒源选自五水合硝酸铒、氧化铒、无水氯化铒和八水合硫酸铒中的至少一者，所述锰源选自四水合氯化锰、无水氯化锰、无水硫酸锰和一水合硫酸锰中的至少一者，所述镱源选自氯化镱、五水硝酸镱、氧化镱和碳酸镱中的至少一者，所述钇源选自硝酸钇、氧化钇、六水合氯化钇和磷酸钇中的至少一者，所述醇选自甲醇、乙醇和丙醇中的至少一者。

3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其中，在步骤2)中，相对于30mg的所述OA-UCNPs，所述PAA水溶液中聚丙烯酸的用量为0.1-0.3g，所述PAA水溶液的体积为5-10mL，所述溶剂的容量为3-5mL；

优选地，在步骤2)中，所述配位体交换反应至少满足以下条件：反应温度为20-40℃，反应时间为18-30h；

更优选地，在步骤2)中，所述溶剂选自三氯甲烷、二氯甲烷、环己烷和苯中的至少一者；

再优选地，所述聚丙烯酸的重均分子量为1000-3000；

进一步优选地，在步骤3)中，相对于2.5mg的所述PAA-UCNPs，所述抗体1的用量为0.05-0.2μg，所述BSA的用量为1-5mg，所述EDC的用量为1-5mg，所述NHS的用量为1-5mg；

更进一步优选地，在步骤3)中，相对于2.5mg的所述PAA-UCNPs，所述MES缓冲溶液与PBS缓冲溶液的用量各自独立为1.5-3mL；并且，所述MES缓冲溶液的pH各自独立地为6.4-8.4；

再进一步优选地，在步骤3)中，所述振荡孵育至少满足以下条件：振荡温度为15-35℃，振荡时间为1.5-2.5h；所述二次振荡至少满足以下条件：振荡温度为15-35℃，振荡时间为12-30h；所述三次振荡至少满足以下条件：振荡温度为15-35℃，振荡时间为0.5-3h；

更再进一步优选地，在步骤3)中，所述抗体1为牌号1A6的抗体。

4.一种UCNPs-Ab₁，其特征在于，所述UCNPs-Ab₁通过权利要求1-3中任意一项所述的制备方法制备而得。