[发明专利]快速鉴定光皮梾木种群的分子检测方法有效
| 申请号： | 201710142227.3 | 申请日： | 2017-03-10 |
| 公开（公告）号： | CN106967793B | 公开（公告）日： | 2020-12-11 |
| 发明（设计）人： | 王明怀;林军;黄金华;张良波;张应中;徐煲铧;张绍勋;邝兆勇;邓文剑;叶代全;何祯祥 | 申请（专利权）人： | 广东省林业科学研究院 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司： | 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人： | 万志香 |
| 地址： | 510520 广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 快速 鉴定 光皮梾木 种群 分子 检测 方法 | ||
1.一种快速鉴定光皮梾木种群的分子检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）、以光皮梾木的DNA作为模板，分别以SEQ ID No:1~2、SEQ ID No:3~4、SEQ ID No:5~6、SEQ ID No:7~8、SEQ ID No:9~10、SEQ ID No:11~12、SEQ ID No:13~14、SEQ ID No:15~16、SEQ ID No:17~18、SEQ ID No:19~20、SEQ ID No:21~22、SEQ ID No:23~24、SEQ ID No:25~26、SEQ ID No:27~28、以及SEQ ID No:29~30作为引物对，进行PCR扩增，获得微卫星分子标记数据；
（2）、对上述微卫星分子标记数据进行统计分析，鉴定归类光皮梾木种群。
2.根据权利要求1所述的快速鉴定光皮梾木种群的方法，其特征在于，步骤(1)中所述PCR扩增的反应程序为：
步骤S1，94℃下预变性5min；
步骤S2，94℃下变性30s；
步骤S3，57℃下退火30s；
步骤S4，72℃下延伸20s；
步骤S5，将所述步骤S2至所述步骤S4重复35次，且最后一次的所述步骤S4持续10min。
3.根据权利要求1所述的快速鉴定光皮梾木种群的方法，其特征在于，步骤(1)中所述PCR扩增的反应体系为：DNA模板1.0μL、引物对0.2μL、Mix 10μL，加ddH2O至20μL。
4.根据权利要求3所述的快速鉴定光皮梾木种群的方法，其特征在于，所述Mix包括Taq酶，dNTPs和缓冲液。
5.根据权利要求1至4任一项所述的快速鉴定光皮梾木种群的方法，其特征在于，所述统计分析采用的软件为非商业化GenAlEx 6 .503软件。
6.根据权利要求1至4任一项所述的快速鉴定光皮梾木种群的方法，其特征在于，所述DNA提取自叶片。
7.一种快速鉴定光皮梾木种群的引物对，其特征在于，所述引物对包括SEQ ID No:1~2、SEQ ID No:3~4、SEQ ID No:5~6、SEQ ID No:7~8、SEQ ID No:9~10、SEQ ID No:11~12、SEQ ID No:13~14、SEQ ID No:15~16、SEQ ID No:17~18、SEQ ID No:19~20、SEQ ID No:21~22、SEQ ID No:23~24、SEQ ID No:25~26、SEQ ID No:27~28、以及SEQ ID No:29~30。
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