[发明专利]一种莼菜丛生芽的诱导方法

权利要求书

1.一种莼菜丛生芽的诱导方法，其特征在于，包括以下步骤：

A、外植体选择与预处理：选择颜色鲜绿，淤泥覆盖少的可萌发腋芽的莼菜茎段作为外植体，用碱性洗涤剂浸泡10min，除去表面淤泥，再用自来水冲洗1小时，用蒸馏水反复冲洗4-5次，用无菌水再反复清洗4-5次，置于无菌操作台；

B、外植体灭菌：在无菌操作台上首先用75%乙醇浸泡30秒，用无菌水冲洗4-5次，再进行表面消毒，无菌水冲洗4-5次，在无菌滤纸上将水吸干，待用；

C、芽诱导：选择1.0 mg/L 6-BA和0.15 mg/L NAA的MS固体培养基，蔗糖质量浓度为3%，活性炭质量浓度为0.4%，pH调至5.8-6.0，固体培养基装于组培瓶中；固体培养基经过120℃灭菌处理20min，冷却后，接入灭菌后的1-1.5cm的莼菜外植体，加入无菌水超过固体培养基面3-4cm，置于光照培养箱中培养，待幼芽长至2.0-3.0cm进行增殖培养；

D、芽增殖培养：选择蔗糖质量浓度3%，活性炭质量浓度为0.4%的MS固体培养基，添加0.5-2.0 mg/L 6-BA、2-4 mg/L 2,4-D、0.1-0.5 mg/L NAA的激素；培养基分装、培养基灭菌方式与芽诱导相同，加入无菌水超过固体培养基面3-4cm，接入长2.0-3.0cm的幼芽于光照培养箱中，进行增殖培养；

所述的步骤C、D均采用无菌环境，光照60-70μE/（m²·s），光照周期为12h/d，室内温度25±2℃。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤B中，所述的表面消毒采用0.1%氯化汞，加入几滴吐温80，进行表面消毒10min。