[发明专利]一种检测西他沙星中异构体杂质含量的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种检测西他沙星中异构体杂质含量的方法，属于化学分析技术领域。

背景技术

本领域公知：药物中的杂质是影响药物纯度的主要因素，如果药物中所含杂质超过质量标准规定的限量要求，极有可能造成药物的外观形状、理化参数发生改变，甚至影响药物的稳定性，会致使药物活性降低而毒副作用增加，严重危害药物的产品质量和患者的用药安全；同时，药物中的杂质涵盖范围非常广泛，不仅包括常规意义上不同分子式的杂质，对于手性药物而言，还包括药物异构体的杂质；药物中大约有80％以上的药物都是手性药物，大多数情况下，其中一种异构体具有药理活性，而另一种异构体通常活性差，甚至有毒副作用，因此对手性异构体的分析检测就显得尤为重要。

西他沙星(Sitafloxacin，STFX，别名DU-6859a)是由日本第一制药三共株式会社(Daiichi Sankyo)开发的第四代广谱氟喹诺酮类抗菌药，药用形式为3/2水合物(M/W＝436.84)，化学结构式为：

其主要结构特点是1位N原子上的顺式氟代环丙烷取代基，现认为西他沙星优异的药效学、药动学特征多与该基团的存在有关；临床上，西他沙星主要用于呼吸道感染、泌尿生殖系统感染、咽喉扁桃体炎、中耳炎及牙周炎等急、慢性感染；西他沙星具有良好的体内、外抗菌活性，抗菌谱广，其抗菌作用方面的亮点包括对含氟喹诺酮类耐药菌株在内的一些耐药菌具有良好抗菌活性，对细菌靶蛋白的抑制能力强，诱导耐药的可能性较低应用前景良好。

西他沙星结构中有3个手性中心，共计4对异构体，具体如下：

因此在合成过程中会可能产生上述异构体杂质。

由于目前西他沙星主要是按照以下合成路线进行合成：

因由于IMF和IMG这两个异构体在合成路线中不会产生，因此在杂质检测时通常不需要考虑，但是对其余异构体杂质IMA、IMB、IMC、IMD和IME则需要进行严格控制，其中的IMA、IMB和IMC异构体需要进行准确地定量分析，而IMD和IME异构体则只需要进行定性分析，需要保证检测时IMD和IME异构体对其它异构体杂质的检测不会构成干扰。

目前对西他沙星异构体的分析方法主要采用HPLC手性分析方法，例如：张秋佳等采用十八烷基硅烷键合硅胶柱为色谱柱，选用D-苯丙氨酸为手性添加剂，硫酸铜作为配位金属，以HPLC法分离西他沙星手性药物(HPLC法测定西他沙星异构体，张秋佳、陈雷、邹德超、张猛，中国抗生素杂志2012年3月第37卷第3期)，该方法存在色谱柱昂贵，色谱柱平衡时间长，使用寿命短，柱效低，仅能分离出西他沙星异构体中的IMA和IMB两个异构体杂质等缺陷；朱子微等采用十八烷基硅烷键合硅胶柱为色谱柱，选用L-苯丙氨酸为手性添加剂，硫酸铜作为配位金属，以HPLC法分离西他沙星异构体(HPLC法测定西他沙星片异构体的方法研究，朱子微，宓寅筱，张晓丽，叶虹，中国抗生素杂志2015年12月第40卷第12期)，该方法虽然分离度有所提高，但是也仅能分离出西他沙星中的IMA、IMB和IMC三个异构体杂质。

除了手性HPLC法，也有文献曾报道采用毛细管电泳手性拆分西他沙星异构体，例如：庄晓庆等采用β-环糊精以及硫酸化β-环糊精作为手性添加剂，在毛细管电泳上分离了西他沙星STX及其三个异构体IMA、IMB和IMC(毛细管电泳手性拆分西他沙星异构体，庄晓庆、毛白杨、狄斌、解双陆，药物分析杂志Chin J Pharm Anal 2012，32(8))，该方法虽然分离度有所提高，但是分离度依旧较低，重现性差，仅能将STX及IMA、IMB和IMC进行分离，无法实现对西他沙星中IMD和IME异构体的定性定量分析。

综上所述，虽然目前西他沙星异构体的手性分析检测方法较多，但是存在检测分析成本太高、操作复杂、分离度低、灵活性差，最多仅能分离出西他沙星异构体中的IMA、IMB和IMC杂质，不能实现对西他沙星中的IMD和IME异构体杂质的定性定量分析等问题，不能实现对西他沙星质量的精确监控。

发明内容

针对现有技术存在的上述问题，本发明的目的是提供一种成本低廉、操作简单、分离度高、灵活性好、可完全检测分析西他沙星中IMA、IMB、IMC、IMD和IME各异构体杂质的检测西他沙星中异构体杂质含量的方法，以满足西他沙星质量监控要求。

为实现上述发明目的，本发明采用的技术方案如下：

一种检测西他沙星中异构体杂质含量的方法，包括如下步骤：

c)分别制备各异构体及西他沙星的对照品溶液；