[发明专利]一种虾肝肠微孢子虫LAMP检测试剂盒在审
申请号: | 201710044793.0 | 申请日: | 2017-01-19 |
公开(公告)号: | CN106591474A | 公开(公告)日: | 2017-04-26 |
发明(设计)人: | 林锋;刘莉;曹铮;卢淑娟 | 申请(专利权)人: | 浙江省淡水水产研究所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/04 |
代理公司: | 杭州杭诚专利事务所有限公司33109 | 代理人: | 尉伟敏,赵越剑 |
地址: | 313001 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 肝肠 孢子 lamp 检测 试剂盒 | ||
1.一种虾肝肠微孢子虫LAMP检测试剂盒,其特征在于,包括组织裂解液及LAMP扩增反应液,所述LAMP扩增反应液各组分如下:LAMP内引物各1.4mM,LAMP外引物各0.2mM,20mM Tris-HC,10mM氯化钾,15mM硫酸铵,8mM硫酸镁,0.1%Triton X-100,0.6M甜菜碱,1.4mM dNTP,2.5U/μL Bst DNA聚合酶大片段,1.25mM钙黄绿素,25mM MnCl2,水余量。
2.根据权利要求1所述的一种虾肝肠微孢子虫LAMP检测试剂盒,其特征在于,所述LAMP外引物为引物对,具体如下:
引物EHP-F3:5’-GGGATCAAGGACGAAGGCT-3’,
引物EHP-B3:5’-CAGCACAATCCACTCCTGG-3’。
3.根据权利要求1所述的一种虾肝肠微孢子虫LAMP检测试剂盒,其特征在于,所述LAMP内引物为引物对,具体如下:
引物EHP-FIP:5’-AAGCATCGCTCTCGCAACACCACACCGCTGTAGTTCTAGCA-3’,
引物EHP-BIP:5’-TTCGGGCTCTGGGGATAGTACGGTCCTTCCGTCAATTTCGCT-3’。
4.根据权利要求1或2或3所述的一种虾肝肠微孢子虫LAMP检测试剂盒,其特征在于,所述Tris-HC的pH为8.0~9.0。
5.根据权利要求1或2或3所述的一种虾肝肠微孢子虫LAMP检测试剂盒,其特征在于,所述组织裂解液各组分的组成为:50~100mM Tris-HCl,20~40mM EDTA,40~100μg/mL蛋白酶K,40~100μg/mL RNase A,0.5%~1.5%SDS,100~200mM NaCl,水余量。
6.根据权利要求5所述的一种虾肝肠微孢子虫LAMP检测试剂盒,其特征在于,所述EDTA的pH为7.0~8.0。
7.根据权利要求1所述的一种虾肝肠微孢子虫LAMP检测试剂盒,其特征在于,所述虾肝肠微孢子虫LAMP检测试剂盒还包括阳性对照样品以及阴性对照样品,其中阳性对照样品为虾肝肠微孢子虫基因组DNA,阴性对照样品为无核酸的RNase free water。
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