[发明专利]一种修饰纳米导电聚苯胺心脏组织工程支架的制备方法及其应用

权利要求书

1.一种聚苯胺纤维蛋白凝胶复合支架的制备方法，其特征在于，首先采用无细胞毒性的凝血酶和纤维蛋白原交联作用合成得到纤维蛋白原凝胶支架，然后运用化学氧化合成法，直接在纤维蛋白凝胶支架上合成纳米尺度的导电聚苯胺，最后接枝上生长因子，获得聚苯胺纤维蛋白凝胶复合支架。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，是在合成在纤维蛋白原凝胶支架材料的基础上，将纤维蛋白原凝胶支架浸润在合成PANI的反应体系溶液中，让氧化合成的PANI在支架的空隙当中“生长”，从而直接在凝胶支架上合成PANI，得到接枝上PANI材料的纤维蛋白支架复合材料，最后接枝上促血管生长因子VEGF，获得聚苯胺纤维蛋白凝胶复合支架。

3. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1.制备纤维蛋白原凝胶支架

S11.用高糖无血清DMEM/F12混合培养基溶解纤维蛋白原冻干粉，制成5～15mg/ml的胶状溶液；再加入凝血因子溶液，混匀成胶状混合物；

S12.将胶状混合物35～38℃静置25～35min，得纤维蛋白原凝胶支架；

S2.纳米聚苯胺在纤维蛋白原凝胶支架上的合成

S21.苯胺溶液加入HCl中混合得溶液A；过硫酸铵在HCl中溶解，并加入乙醇搅拌，冰水浴冷却，得溶液B；

S22.将步骤S1制备的纤维蛋白原凝胶支架浸润在溶液B中，并在冰水浴中将溶液A缓慢加入到溶液B中，搅拌混合；停止搅拌后在冰水浴中反应；

S23.反应结束后将纤维蛋白原凝胶支架取出，得到接枝PANI材料的纤维蛋白支架复合材料，记为PANI-Scaffold；

S3.接枝生长因子：活化生长因子的氨基，活化PANI-Scaffold上的羧基，通过吸附作用和氨基与羧基的作用，将生长因子VEGF接枝到PANI-Scaffold上。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤S11所述凝血因子为牛血浆凝血酶。

5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤S21和S13中的HCl为0.05～0.15M的HCl；溶液A中苯胺溶液与HCl的体积比为2：45～55；溶液B中过硫酸铵与HCl的质量体积比为9～10g/L，且HCl与乙醇的体积比为5：2～4。

6.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤S21所述搅拌的时间为5～15min，步骤S22所述缓慢加入的速度为0.2～0.3ml/min。

7.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤S22所述溶液A和溶液B的体积比为1：7～9，步骤S22所述反应的时间为10～15h。

8.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤S3的具体方法为：

S31.将PANI-Scaffold置于EDC溶液中，缓慢震荡1～3h；

S32.生长因子VEGF溶液中加入DCC溶液，以活化生长因子；

S33.将步骤S31的产物置于步骤S32的溶液中，震荡反应1～3h；

S34.步骤S33的反应产物在PBS中避光过夜，取出后再用PBS清洗，晾干即得到聚苯胺纤维蛋白凝胶复合支架。

9.根据权利要求1～8任一所述方法制备得到的聚苯胺纤维蛋白凝胶复合支架。

10.权利要求9所述聚苯胺纤维蛋白凝胶复合支架在作为或制备心脏组织工程支架材料方面的应用。