[发明专利]玉米赤霉烯酮检测卡以及使用该检测卡的玉米赤霉烯酮检测方法

权利要求书

1.一种玉米赤霉烯酮检测卡，所述检测卡包含样品垫、金标垫、层析膜、吸水垫和底板，其特征在于，所述样品垫、金标垫、层析膜和吸水垫在所述底板上依次排列；所述金标垫上涂覆固定有抗玉米赤霉烯酮抗体的胶体金，并且所述层析膜上设置固定有玉米赤霉烯酮半抗原的检测线和固定有二抗的质控线。

2.如权利要求1所述的玉米赤霉烯酮检测卡，其中，所述样品垫由以下步骤制备：

配制浸泡液；

用配制的浸泡液浸泡所述样品垫；以及

将浸泡后的所述样品垫烘干，

其中，所述浸泡液包含0.5-3wt％的保护蛋白、2-10wt％的二糖；并使用缓冲体系将所述浸泡液的pH调节为7.0-9.0。

3.如权利要求2所述的玉米赤霉烯酮检测卡，其中，所述保护蛋白为牛血清白蛋白和/或酪蛋白；所述二糖为蔗糖和/或海藻糖；所述缓冲体系为PBST缓冲体系；

其中，所述浸泡步骤包括将所述样品垫平放于所述浸泡液中，使之完全浸入，浸泡30min-2h；

其中，所述烘干步骤包括取出所述样品垫，在37℃干燥环境中放置2h-10h，随后放置于湿度<10％的环境中保存备用。

4.如权利要求1所述的玉米赤霉烯酮检测卡，其中，所述金标垫由以下步骤制备：

配制浸泡液；

用配制的浸泡液浸泡所述金标垫；

将浸泡后的所述金标垫烘干；

向所述金标垫喷涂固定有抗玉米赤霉烯酮抗体的胶体金；

使喷涂后的所述金标垫干燥；以及

组装，

其中，所述浸泡液包含0.5-1wt％的BSA、0.01-0.1wt％的吐温80；并且，使用缓冲体系将所述浸泡液的pH调节为7.0-9.0；以及

其中，在进行所述喷涂时，所述金标垫的含水量为60-80wt％；并且，在进行所述干燥后，所述金标垫的含水量为<10wt％。

5.如权利要求4所述的玉米赤霉烯酮检测卡，其中，所述金标垫靠近所述层析膜的一端有0.8-1.2mm的长度压在所述层析膜上方、靠近所述样品垫的一端有0.5-2.0mm的长度被压在所述样品垫下方，并且所述层析膜和所述样品垫间的所述金标垫长度为0.5-1.5mm。

6.如权利要求1所述的玉米赤霉烯酮检测卡，其中，所述层析膜由以下步骤制备：

将玉米赤霉烯酮半抗原和二抗固定在所述层析膜上，分别形成检测线和质控线；

使固定后的所述层析膜干燥；以及

组装，

其中，在进行所述固定时，所述层析膜的含水量为50％-80wt％；并且，在进行所述干燥后，所述层析膜的含水量为<10wt％。

7.如权利要求6所述的玉米赤霉烯酮检测卡，其中，所述层析膜靠近所述金标垫的一端有0.8-1.2mm的长度被压在所述金标垫下方，靠近所述吸水垫的一端有0.5-1.5mm的长度被压在所述吸水垫下方。

8.如权利要求4所述的玉米赤霉烯酮检测卡，其中，所述缓冲体系为PB缓冲液。

9.一种对样品中的玉米赤霉烯酮进行检测的方法，所述方法包括如下步骤：

样品前处理；

使用权利要求1-8中任意一项所述的玉米赤霉烯酮检测卡对样品进行检测；以及

结果分析，

优选地，所述样品为饲料。

10.如权利要求9所述的方法，其中，

所述样品前处理包括：按照样品:70-100％(v/v)甲醇为1:2-1:5的重量体积比称取样品并量取甲醇，混合，上下颠倒充分混匀3-10min；随后在室温下离心1-10min，离心速度为5000-10000rpm；取上清加至新的离心管中作为检测样品；

所述对样品进行检测包括：向所述样品垫上离所述样品垫两端的距离为3-8mm的部位缓慢逐滴滴加样品液，直到所述样品液流至所述层析膜时停止滴加所述样品液；和/或

所述结果分析包括：(1)当所述样品液已上升至接触所述吸水垫时，若所述检测线和所述质控线均清晰可见，则判定检测结果为阴性，否则继续静置；(2)静置5-15min后，若所述质控线清晰可见、且所述检测线未出现，则判定检测结果为阳性；(3)静置5-15min后，若所述检测线与所述质控线均未出现、或所述检测线清晰可见而所述质控线未出现，则判定检测结果无效，取另一检测卡重新检测。