[发明专利]一种改进的ARMS引物结构(Super-ARMS)及其使用方法有效
申请号: | 201611159646.X | 申请日: | 2016-12-15 |
公开(公告)号: | CN106755388B | 公开(公告)日: | 2019-08-23 |
发明(设计)人: | 江风阁;林清华;陈婷;陈曦;阮力;宋庆涛 | 申请(专利权)人: | 厦门艾德生物医药科技股份有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6858 | 分类号: | C12Q1/6858;C12N15/11 |
代理公司: | 厦门市首创君合专利事务所有限公司 35204 | 代理人: | 张松亭;游学明 |
地址: | 361000 福*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 碱基 反向通用引物 错配碱基 反向引物 特异引物 突变位置 序列互补 正向引物 位碱基 条链 正向 改进 | ||
1.一种改进的ARMS引物结构,其特征在于,包括:
正向特异引物,它包括如下三部分:
1)第一序列,其长度为18-40个碱基,其中3′末端第1位碱基为突变位置,3′末端第2-4位有一错配碱基,其余碱基和待测序列互补;
2)第二序列,其长度为6-20个碱基,其和第一序列互补;
3)spacer,其连接第一序列的5′末端和第二序列的3′末端;
反向通用引物,其长度为15-40个碱基,和待测序列的另一条链互补;
其中,所述的反向引物的Tm值比正向引物的第一序列的Tm值低3-8℃。
2.如权利要求1所述的一种改进的ARMS引物结构,其特征在于:第一序列长度为18-30bp。
3.如权利要求1所述的一种改进的ARMS引物结构,其特征在于:第二序列长度为8-16bp。
4.一种改进的ARMS-PCR体系,它包括权利要求1所述的改进的ARMS引物结构。
5.如权利要求4所述的一种改进的ARMS-PCR体系,其特征在于,还包括blocker引物。
6.如权利要求5所述的一种改进的ARMS-PCR体系,其特征在于,blocker引物,其长度为15-50bp。
7.如权利要求4或5或6所述的一种改进的ARMS-PCR体系,其特征在于,还包括荧光探针。
8.一种AMRS-PCR方法,其特征在于:它采用权利要求1所述的一种改进的ARMS引物结构。
9.如权利要求8所述的一种AMRS-PCR方法,其特征在于:还使用blocker引物。
10.如权利要求8所述的一种AMRS-PCR方法,其特征在于:还包括使用荧光探针。
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