[发明专利]一种来源于马粪海胆生殖腺的水溶性多糖的制备方法及其应用有效
| 申请号： | 201611156630.3 | 申请日： | 2016-12-15 |
| 公开（公告）号： | CN106589155B | 公开（公告）日： | 2018-12-07 |
| 发明（设计）人： | 王春华;赵峰;刘永俊;辛文妤;侯桂革;杜敏 | 申请（专利权）人： | 滨州医学院 |
| 主分类号： | C08B37/00 | 分类号： | C08B37/00;A61K31/715;A61P35/00 |
| 代理公司： | 烟台双联专利事务所(普通合伙) 37225 | 代理人： | 吕静 |
| 地址： | 264003 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 总多糖 制备 水溶性多糖 马粪海胆 生殖腺 提取液 木瓜蛋白酶酶解 凝胶柱色谱分离 海胆生殖腺 抗肿瘤药物 抗肿瘤作用 无毒副作用 后处理 高温加热 药物制剂 医药领域 影响多糖 除蛋白 复溶性 酶失活 上清液 水提取 醇沉 海胆 透析 性状 生产成本 应用 开发 | ||
1.一种来源于马粪海胆生殖腺的水溶性多糖的制备方法，特征在于
按如下具体步骤进行：
a、取新鲜马粪海胆的海胆生殖腺，粉碎后用丙酮脱脂，获得海胆黄脱脂粉末；
b、脱脂粉末用2倍量体积的90-100℃热水处理10-30min；而后加入8倍量体积的20-60℃水中提取2-6小时，再用10-20倍量体积的20-60℃水提取2-3次，合并提取液浓缩至总体积的二分之一；
c、向步骤b获得的浓缩液中加入木瓜蛋白酶，酶解后，加热灭活后再用Sevage法除蛋白10-15次，用旋转蒸发仪减压浓缩；
d、步骤c得到的多糖水溶液经流动蒸馏水透析，透析后的水液加入4倍量无水乙醇，离心得多糖沉淀，用无水乙醇洗涤、干燥得马粪海胆总多糖HPP；
e、将步骤d所得马粪海胆总多糖配制成50mg/ml的水溶液，用SephacrylS-300凝胶柱色谱分离，双蒸水为流动相洗脱，每10ml收集一管，苯酚-硫酸法测定每管多糖含量，根据洗脱曲线合并洗脱液，冷冻干燥得到两个马粪海胆多糖，分别命名为HPP-1和HPP-2；
步骤a中，海胆生殖腺利用组织匀浆机充分粉碎后，加入1-2倍量体积的无水丙酮，常温搅拌脱脂，重复脱脂7-10次；
步骤b中，按脱脂粉末：蛋白酶＝100:(4-8)的质量比向浓缩液中加入木瓜蛋白酶，酶解20-30h。
2.如权利要求1所述制备方法获得的水溶性多糖在抗肿瘤药物中的应用。
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