[发明专利]利用PCR-SSCP检测绵羊FTH-1基因插入缺失多态性的方法及其应用

权利要求书

1.利用PCR-SSCP检测绵羊FTH-1基因插入缺失多态性的方法，其特征在于，包括以下步骤：

以待测绵羊全基因组DNA为模板，以引物对P为引物，PCR扩增绵羊FTH-1基因片段；将PCR扩增的片段变性成单链DNA，然后通过聚丙烯酰胺凝胶电泳进行检测；根据电泳结果鉴定绵羊FTH-1基因第639位插入缺失多态性位点的基因型，所述插入缺失多态性位点存在AGAA的插入缺失；

所述的引物对P为：

上游引物：5′- GGTTTCTGAACGAGAGGAG-3′;

下游引物：5′- GATGCCAGCAGTTGTCAC-3′；

所述插入缺失多态性位点具有三种基因型，分别为插入/插入型、缺失/缺失型以及插入/缺失型，电泳结果为：插入/插入型和缺失/缺失型具有一个条带，插入/缺失型具有两个条带；插入/插入型、插入/缺失型的个体的产羔数高于缺失/缺失型。

2.如权利要求1所述的利用PCR-SSCP检测绵羊FTH-1基因插入缺失多态性的方法，其特征在于，所述的PCR扩增反应程序为：94.0℃预变性5.0min；94.0℃变性30.0s，65.0℃退火20.0s，72.0℃延伸30.0s，34个循环；72.0℃延伸5.0min。

3.如权利要求1所述的利用PCR-SSCP检测绵羊FTH-1基因插入缺失多态性的方法，其特征在于，所述的聚丙烯酰胺凝胶电泳采用质量浓度为10％的聚丙烯酰胺凝胶。

4.如权利要求1所述的利用PCR-SSCP检测绵羊FTH-1基因插入缺失多态性的方法在绵羊分子育种中的应用。

5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，建立具有AGAA碱基插入等位基因的绵羊群体，以提高绵羊产羔数。

6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述绵羊选自湖羊或小尾寒羊。