[发明专利]一种高产肝素前体的重组枯草芽孢杆菌及其应用

权利要求书

1.一种高产肝素前体的重组枯草芽孢杆菌，其特征在于，是在枯草芽孢杆菌B.subtilis 168基因组整合表达KfiC和KfiA基因的基础上，以pP43NMK为表达载体共表达肝素前体合成途径的关键酶基因，所述共表达是指共表达tuaD、glmU、gtaB、glmM、glmS。

2.权利要求1所述重组枯草芽孢杆菌的构建方法，其特征在于，以整合共表达KfiC和KfiA基因的B.subtilis 168为宿主，以pP43NMK为表达载体共表达肝素前体合成途径的关键酶基因；所述共表达是指共表达tuaD、gtaB、glmU、glmM、glmS。

3.一种发酵生产肝素前体的方法，其特征在于，所述方法是将权利要求1所述的重组枯草芽孢杆菌接种至发酵培养基中，在37℃下培养24～60h。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述发酵培养基以蔗糖为碳源。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述发酵培养基的组成成为分：20g/L酵母粉，50g/L蔗糖，3.9g/L硫酸钾，1.5g/L硫酸镁，50mM磷酸盐缓冲液，pH 6.5-7.5。

6.权利要求1所述的重组枯草芽孢杆菌在医药领域制备含肝素的药品、医药配制品方面的应用。