[发明专利]一种高粘附益生性屎肠球菌及其应用

说明书

本发明公开了一种高粘附益生性屎肠球菌(Enterococcus faecium)及其应用，该屎肠球菌的保藏编号为CGMCC NO.13229。本发明的屎肠球菌具有具有较强的抗逆性，能够耐高温、耐酸、黏附性能好，还具有优良的益生性，能够提高饲料利用率，促进饲料中营养物质的消化吸收，促进动物生长；增强动物的免疫功能，提高日增重，降低料肉比；具有无污染，无残留，生物环保等特点。本发明的屎肠球菌可作为一种新型的益生菌添加剂，广泛应用于饲料中。

技术领域

本发明属于微生物应用技术领域，具体地说，涉及一种高粘附益生性屎肠球菌及其应用。

背景技术

在养殖业中动物发生疾病会造成很大的经济损失，如肠炎、腹泻等，很多都是由病原菌引起的，并且对于人类的健康也造成着一定的威胁。随着抗生素的发现使这一状况得以改善，抗生素可以在短时间内杀死致病菌，能有效地治疗细菌性疾病，并且抗生素还能促进动物的生长。所以抗生素可以用于治疗和预防一些疾病，还可以用作促生长剂。但是随着科学的进步，抗生素的弊端也渐渐被人们发现。

随着人们对畜产品安全和环境保护意识的不断加强，作为抗生素的替代品，益生菌越来越多的应用于动物营养和饲料中。益生菌是一类能改善动物胃肠道微生态平衡，有益于动物健康和生产性能发挥的微生物添加剂。其主要作用效果体现在改善动物新陈代谢，提高营养物质吸收和利用，提高免疫力，减少环境污染等方面发挥重要作用。益生菌被允许使用于饲料添加利，能通过黏附机制和竞争性抑制等作用阻止肠道中的有害微生物的生长繁殖，并且其代谢产物能杀死病原菌，具备维持动物肠道微生物的稳态、促进动物的生长、预防和治疗疾病等功效，并能降低动物的死亡率。其不仅解决了抗生素对肠道内正常微生物的不良影响的问题，还能避免使用抗生素而产生副作用以及抗药性等等。

屎肠球菌(Enterococcus faecium)是动物肠道正常乳酸菌类，革兰氏阳性，兼性厌氧，无芽孢和鞭毛的椭球形或球形菌。生长温度为30～40℃，最适温度为35～38℃，适宜的pH为5.0～7.5，抗逆性较差，代谢产生大量乳酸。研究发现屎肠球菌能够增强仔猪的免疫系统功能，并改善肠道菌群结构从而促进断奶仔猪的生长，可以降低肉鸡盲肠大肠杆菌数量增加乳酸杆菌的数量，并使肠道菌群处于稳定的状态，还能提高产蛋后期的产蛋率、产蛋数量以及蛋重。屎肠球菌对免疫器官、肠道绒毛发育、肠道微生物的数量和多样性产生影响，对肉鸡肠道黏膜的定量蛋白质组学分析发现屎肠球菌与42种肠黏膜蛋白物质代谢、免疫和抗氧化系统以及细胞结构有关。

益生菌发挥益生作用的前提是黏附定植在肠道上皮中，并且其黏附定植具有宿主特异性，同源益生菌的饲用效果要优于异源，细菌只能定植于同源动物的消化道上皮细胞表面。所以想要获得良好的动物饲用的益生菌需要从动物体内分离和筛选。

发明内容

本发明的目的是提供一种高粘附益生性屎肠球菌及其应用。

为了实现本发明的目的，本发明的屎肠球菌是从鸡肠道混合菌中分离出，经过菌落形态观察、黏附及抑菌性能试验等获得目标菌株，经16S rDNA基因序列分析，屎肠球菌16SrDNA扩增电泳图如图1。将菌株屎肠球菌的16S rDNA的序列与GenBank中已知序列进行Blast比对，从数据库中获得相关的种属的16S rDNA，并通过菌种的细胞形态、生理生化特征和16S rDNA序列等实验数据综合确定该菌株属于肠球菌属，最终确定为厚壁菌门，杆菌纲，乳杆菌目，肠球菌科，肠球菌属的屎肠球菌(Enterococcus faecium)。

该菌株黏附性能好，耐受性强，体外益生效果评价，该菌株为能够抑制病原菌且具有益生和提高动物的饲料利用率的效果，其16S rDNA序列如SEQ ID NO.1所示。该菌株已于2016年11月2日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101)，分类命名为屎肠球菌(Enterococcus faecium)，保藏号为CGMCC No.13229。