[发明专利]富含血小板血浆结合人体间充质干细胞分泌因子的混合冻干粉及其制作方法在审
申请号: | 201611122448.6 | 申请日: | 2016-12-08 |
公开(公告)号: | CN108057043A | 公开(公告)日: | 2018-05-22 |
发明(设计)人: | 吕瑞华 | 申请(专利权)人: | 吕瑞华 |
主分类号: | A61K35/28 | 分类号: | A61K35/28;A61K35/33;A61K9/19;A61P39/06;A61K8/98;A61K8/02;A61Q19/08;A61K35/16 |
代理公司: | 隆天知识产权代理有限公司 72003 | 代理人: | 张福根 |
地址: | 中国台*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 富含 血小板 血浆 结合 人体 间充质 干细胞 分泌 因子 混合 干粉 及其 制作方法 | ||
1.一种富含血小板血浆结合人体间充质干细胞分泌因子的混合冻干粉,其包含有:
一富含血小板血浆粉末;以及
一间充质干细胞分泌因子粉末;
其中,该混合冻干粉内所含的该富含血小板血浆粉末的重量百分比大于该间充质干细胞分泌因子粉末的重量百分比。
2.如权利要求1所述的混合冻干粉,其中该间充质干细胞分泌因子由人体骨骼、人体脐带、人体脂肪的间充质干细胞或纤维母细胞培养而得。
3.如权利要求1所述的混合冻干粉,其中该富含血小板血浆由欲使用该混合冻干粉的一使用者血液中取得。
4.如权利要求1所述的混合冻干粉,其中该富含血小板血浆粉末与该间充质干细胞分泌因子粉末的重量百分比的比例介于5:1~7:1之间。
5.如权利要求1所述的混合冻干粉,其中该富含血小板血浆粉末与该间充质干细胞分泌因子粉末为分别对该富含血小版血浆与该间充质干细胞分泌因子经-80℃急速冷冻与-55℃冷冻干燥12~16小时而得的冻干粉。
6.一种富含血小板血浆结合人体间充质干细胞分泌因子的混合冻干粉的制作方法,其包含下列步骤:
离心一全血样本并于无菌环境中取得一富含血小板血浆;
于无菌环境中培养一人体间充质干细胞以取得富含一间充质干细胞分泌因子的一培养液;
分别冷冻干燥该富含血小板血浆及该培养液以得一富含血小板血浆粉末及一间充质干细胞分泌因子粉末;以及
混合该富含血小板血浆粉末与该间充质干细胞分泌因子粉末以得该混合冻干粉;
其中,该混合冻干粉所使用的该富含血小板血浆的重量百分比大于该培养液的重量百分比。
7.如权利要求6所述的制作方法,其中离心该全血样本并于无菌环境中取得该富含血小板血浆的步骤包含以下子步骤:
自欲使用该混合冻干粉的一使用者抽取该全血样本;
将该全血样本以每分钟1,000~1,500转的转速离心5~15分钟;以及
于无菌环境中取出富含该富含血小板血浆的该全血样本离心后的一上层液。
8.如权利要求6所述的制作方法,其中于无菌环境中培养该人体间充质干细胞以取得富含该间充质干细胞分泌因子的该培养液的步骤包含以下子步骤:
在无菌环境中于一生长液内培养该人体间充质干细胞;以及
当该生长液内的该人体间充质干细胞的细胞生长密度大于80%后再持续培养2~3天后,收集该培养液。
9.如权利要求8所述的制作方法,其中该生长液包含DMEM培养基、5%的人体血小板血浆及1mM的非必要氨基酸,以及该DMEM培养基包含有4.0mM的左旋谷氨酰胺(L-Glutamine)及4500mg/L的葡萄糖(Glucose),且不含丙酮酸钠(Sodium Pyruvate)、酚红(Phenol Red)及抗生素。
10.如权利要求6所述的制作方法,其中分别冷冻干燥该富含血小板血浆及该培养液以得该富含血小板血浆粉末及该间充质干细胞分泌因子粉末的步骤包含以下子步骤:
分别急速冷冻该富含血小板血浆与该培养液至-80℃;以及
分别于-55℃干燥急速冷冻后的该富含血小板血浆与该培养液12~16小时以得该富含血小板血浆粉末及该间充质干细胞分泌因子粉末。
11.一种富含血小板血浆结合人体间充质干细胞分泌因子的混合冻干粉的制作方法,其包含下列步骤:
离心一全血样本并于无菌环境中取得一富含血小板血浆;
于无菌环境中培养一人体间充质干细胞以取得富含一间充质干细胞分泌因子的一培养液;
混合该富含血小板血浆与该培养液以得一混合液体;以及
冷冻干燥该混合液体以得该混合冻干粉;
其中,该混合冻干粉所使用的该富含血小板血浆的重量百分比大于该培养液的重量百分比。
12.如权利要求11所述的制作方法,其中冷冻干燥该混合液体以得该混合冻干粉的步骤包含以下子步骤:
急速冷冻该混合液体至-80℃;以及
将急速冷冻后的该混合液体于-55℃干燥12~16小时以得该混合冻干粉。
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