[发明专利]一种清热解毒凉血通淋药物的质量检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种清热解毒凉血通淋药物的质量检测方法，特别是涉及一种利用高效液相色谱法测定中药制剂中灰毡毛忍冬皂苷乙的测定方法，属于制药领域。

背景技术

癃清片是目前市场上销售的一种清热解毒，凉血通淋的中药。用于下焦湿热所致的热淋，症见尿频、尿急、尿痛、腰痛、小腹坠胀。临床药效学实验研究证明，癃清片适宜于治疗老年人泌尿系统感染，有明显的抗炎、镇痛作用，用于治疗泌尿系统感染的有效中成药。

本发明治疗尿路感染及前列腺炎的药物(癃清片)具有明确地抑菌、抗炎、镇痛、利尿、改善微循环、增强机体免疫的作用。其组方中金银花、黄柏、黄连、败酱草、白花蛇舌草清热解毒；赤芍、丹皮、仙鹤草散瘀凉血；泽泻、车前子利水通淋。

《中华人民共和国药典》2015年版一部公开癃清片的处方和制法为：以上十味，泽泻粉碎成细粉，过筛，备用；白花蛇舌草、仙鹤草、金银花、败酱草加水煎煮二次，每次1小时，滤过，合并滤液，滤液浓缩成相对密度为1.25～1.30(50℃)的清膏；其余车前子等五味用60％乙醇加热回流三次，第一次3小时，第二次2小时，第三次1小时，滤过，合并滤液，回收乙醇，浓缩成相对密度为1.25～1.30(50℃)的清膏。与上述清膏合并，加入泽泻细粉及辅料适量，混匀，制粒，干燥，压制成1000片，或包薄膜衣，即得。每片0.6g。

《中华人民共和国药典》2015年版一部“癃清片”品种项下的检测指标包括：鉴别项下包括泽泻显微鉴别，盐酸小檗碱、丹皮酚、芍药苷薄层色谱鉴别；含量测定项下包括盐酸小檗碱的液相色谱测定。

《中华人民共和国药典》2015年版一部增补版“癃清胶囊”品种项下的检测指标包括：鉴别项下包括泽泻显微鉴别，黄连、黄柏、盐酸小檗碱、丹皮酚、芍药苷、金银花、绿原酸薄层色谱鉴别；含量测定项下包括盐酸小檗碱、盐酸黄柏碱的液相色谱测定。

据文献记载[张晓静,刘德福,丁菲菲,田华,邓雁如,郭利平.HPLC法测定癃清片中表小檗碱、黄连碱、盐酸药根碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱和丹皮酚[J].现代药物与临床,2015,05:527-530.]，采用HPLC法同时测定癃清片中表小檗碱、黄连碱、盐酸药根碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱、丹皮酚6种成分。

上述各检测方法中，并未涉及到制剂中金银花与山银花的鉴别。由于山银花与金银花均含有绿原酸，且山银花较金银花价格低很多，因此有必要对制剂中的金银花与山银花进行鉴别，而上述检测方法均未能显著区分这两种药材。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种检测癃清片制剂中山银花的高效液相检测方法。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种癃清片中山银花的检测方法，步骤如下：

(1)对照品溶液的制备：取灰毡毛忍冬皂苷乙对照品适量，精密称定，加浓度为10％～100％有机溶剂制成每1ml含灰毡毛忍冬皂苷乙0.1～0.5mg的溶液，即得；

(2)供试品溶液的制备：取癃清片样品20片，精密称定，研细，取粉末适量，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入10％～100％有机溶剂25～50ml，称定重量，超声或者回流处理20～60分钟，放冷，再称定重量，用10％～100％有机溶剂补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

(3)高效液相色谱法测定：Diamonsil色谱柱；流动相∶乙腈与0.3～0.5％醋酸；流速：0.5ml/min～1.0ml/min；柱温20℃～40℃；采用蒸发光散射检测器，分别精密取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入所述高效液相色谱仪，测定。

所述步骤(1)中有机溶剂为甲醇、乙醇或乙腈。

所述步骤(2)中有机溶剂为甲醇、乙醇或乙腈。

优选的，所述步骤(1)和步骤(2)中的有机溶剂为甲醇。

所述步骤(3)Diamonsil色谱柱为C18反相色谱柱，规格：5μm，250×4.6mm。

所述步骤(3)中乙腈与0.4％醋酸的体积比为10～90∶90～10。

优选的，所述步骤(3)中乙腈与0.4％醋酸的体积比为40∶60。

本发明优选的一种癃清片中山银花的检测方法，步骤为：

(1)对照品溶液的制备：取灰毡毛忍冬皂苷乙对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含灰毡毛忍冬皂苷乙0.2mg的溶液，即得；