[发明专利]解淀粉芽孢杆菌植物亚种WK1菌株及其应用

权利要求书

1.一种解淀粉芽孢杆菌植物亚种WK1菌株，其特征是该菌株的分类命名为解淀粉芽孢杆菌植物亚种（Bacillus amyloliquefaciens subsp.plantarum ）WK1，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC No.11640，保藏日期为 2015年11 月 9 日；该菌株在牛肉膏蛋白胨琼脂平板生长时，菌落直径为2.0～3.0mm、圆形、凸起、边缘波状、表面褶皱粘稠、乳白色、不透明的菌落；革兰氏阳性杆菌，单个或成对排列，有芽孢，芽孢端生，椭圆形，芽孢囊膨大；营养肉汤液体静置培养，表面产生菌膜，液体浑浊；在质量比为10%NaCl 水溶液、pH=1～13条件中生长；WK1菌株抑制山核桃干腐病病原真菌的生长，WK1菌株抑制山核桃干腐病病原真菌生长的主要代谢产物为脂肽类物质中的丰原素fengycins，成分有C15 fengycin A、C16 fengycin A、C17 fengycin A和C18 fengycin A。

2.一种权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌植物亚种WK1菌株的应用，其特征是应用该菌株及其发酵液或灭菌发酵液上清液，抑制山核桃干腐病病原真菌的生长。

3.如权利要求2所述的对解淀粉芽孢杆菌植物亚种WK1菌株的应用，其特征是所述丰原素fengycins包括侧链为normal-、iso- 和 anteiso异构化的C17 fengycin A中的任意两种。

4.一种权利要求2 所述的解淀粉芽孢杆菌植物亚种WK1菌株的发酵液和灭菌发酵液上清液的制备方法， 按如下步骤进行：

（ 1 ） 活化菌种：

将保存在斜面培养基中的解淀粉芽孢杆菌植物亚种WK1菌株，在NA固体培养基上划线生长48小时;

（ 2 ） WK1菌株发酵液的制备：

选取 NA固体培养基上的单菌落，接种于100ml NA液体培养基中，在 37℃、180r/min条件下培养 14 小时，得到种子液；再将种子液按接种量为3%（v/v）分别接种于500ml NA液体培养基中，在37℃、180r/min 条件下培养48小时，得到WK1菌株发酵液;

（ 3 ） WK1灭菌发酵液上清液的制备：

将步骤（2）所述菌体的WK1菌株发酵液于高温高压灭菌锅里121℃灭菌30min后，将灭菌发酵液3000r/min 离心15min后，得WK1灭菌发酵液上清液。

5.一种权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌植物亚种WK1菌株的应用，其特征是应用该菌株及其发酵液或灭菌发酵液上清液的所述的脂肽类物质抑制杉木枯萎病、棉花黄病、哈密瓜枯萎病、黄瓜枯萎病、立枯丝核菌、蔬菜根腐病、茄子辣椒根腐病病原菌菌丝的生长。