[发明专利]具有抗肿瘤作用的番石榴叶有效部位及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种具有抗肿瘤作用的番石榴叶有效部位及其制备方法和应用。该制备方法包括如下步骤：将番石榴叶用醇溶液进行提取，过滤，减压浓缩得到总浸膏；将总浸膏加水分散，依次用石油醚和氯仿萃取，收集氯仿萃取部位；将氯仿萃取部位进行硅胶柱层析，依次用氯仿洗脱、氯仿:甲醇＝0.9‑1.1:0.9‑1.1洗脱、甲醇洗脱；收集氯仿:甲醇＝0.9‑1.1:0.9‑1.1洗脱部位，得到具有抗肿瘤作用的番石榴叶有效部位，可在制备抗肿瘤药物中应用。本发明能够明确番石榴叶提取物中起到抗肿瘤活性的有效部位及其包含的主要成分，为后续的质量控制、成药、进入国际市场提供基础。

技术领域

本发明涉及一种具有抗肿瘤作用的番石榴叶有效部位及其制备方法和应用，属于抗肿瘤药物技术领域。

背景技术

番石榴(Psidium guajava L.)俗称拔子、鸡矢果、芭乐、红心果、喇叭果等，为桃金娘科番石榴属植物，是常绿小乔木或灌木，原产热带美洲和东南亚，现广泛分布和种植于热带、亚热带地区。

现有技术中，番石榴叶提取物通过调控肝脏糖代谢AKT信号通路的机制对脂肪组织肿瘤坏死因子(TNF-α)、过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)基因的表达产生作用，并发现番石榴叶挥发油成分对表皮癌细胞抗增活性最高，是长春碱的4.37倍，另有研究认为番石榴叶提取物抗肿瘤细胞的机制在于抑制了T调节细胞，并增强了Th1细胞的作用。

但是，现有技术中，虽然有报道番石榴叶提取物可以起到抗肿瘤的作用，但是，现有研究并没有完全明确番石榴叶提取物中起到抗肿瘤作用的究竟是哪些主要成分，即使现有技术中提出番石榴叶中提取出某一个单体具有抗肿瘤作用，但因其是单体成分，无法表明具体的有效部位，以及有效部位的组分间协同作用，也导致无法对该番石榴提取物有效部位进行有效的质量控制，以使得提取物有效部位得以成为制剂；更甚者，因成分的不明确导致番石榴提取物无法成药、无法进入国际市场。

发明内容

鉴于上述现有技术存在的缺陷，本发明的目的是提出一种具有抗肿瘤作用的番石榴叶有效部位的制备方法，所得到的番石榴叶提取物能够明确其中起到抗肿瘤性的有效部位及其包含的主要成分，为后续的质量控制、成药、进入国际市场提供基础。

本发明的另一个目是提供由上述制备方法所得到的番石榴叶有效部位。

本发明还有一个目的是提供上述番石榴叶有效部位在制备抗肿瘤药物的应用。

本发明的目的通过以下技术方案得以实现：

一种具有抗肿瘤作用的番石榴叶有效部位的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：

(1)将番石榴叶用醇溶液进行提取，过滤，减压浓缩得到总浸膏；

(2)将总浸膏加水分散，依次用石油醚和氯仿萃取，收集氯仿萃取部位；

(3)将氯仿萃取部位进行硅胶柱层析，依次用氯仿洗脱、氯仿:甲醇＝0.9-1.1:0.9-1.1洗脱、甲醇洗脱，收集氯仿:甲醇＝0.9-1.1:0.9-1.1的洗脱部位，得到具有抗肿瘤作用的番石榴叶有效部位。

所述的步骤(1)中，醇溶液为乙醇、乙醇水溶液、甲醇或甲醇水溶液；乙醇水溶液中，乙醇的体积百分比浓度为大于等于70％；甲醇水溶液中，甲醇的体积百分比浓度为大于等于70％。

所述的步骤(1)中，提取的方式为渗漉、超声或加热回流；番石榴叶用醇溶液进行提取时，以重量计，醇溶液的用量为番石榴叶用量的5-10倍；提取次数为不低于2次。

所述的步骤(2)中，将总浸膏加水分散时，以体积计，水的用量与总浸膏的用量比为2-1∶1-2。

所述的步骤(2)中，依次用石油醚和氯仿萃取时，以体积计，石油醚或氯仿的用量为被萃取相的1-2倍；萃取次数为2-7次。