[发明专利]农业方法

说明书

本发明涉及一种用于增强植物生长的方法，并且涉及可用于该方法中的微生物和包括这些微生物的组合物。

已知固氮细菌重氮营养葡糖醋杆菌(Gluconacetobacter diazotrophicus，Gd)能够定植植物细胞(细胞内定植)并因此增强那些植物的生长(EP-A-142299)。然而，不同Gd菌株实现这种有用功能的能力可以根据诸如作物性质、施用方式和所使用的特定Gd菌株等因素而变化。例如，已经发现富含糖的作物(诸如甘蔗或甜菜)可以更容易被Gd定植并且可以支持更高水平的定植。此外，在细胞内定植植物的能力可以根据不同的Gd菌株而变化。虽然已经证明出某些菌株具有在各种施用条件下有效定植细胞的能力，但是其它菌株(诸如在WO 2010/022517中描述的那些菌株)似乎在很大程度上在细胞间起作用。预期细胞内定植提供了一种更高效且更有效的方法来增强植物的氮供应，从而改善植物生长。

诸位申请人已经发现了另一种细菌菌株，其有利于细菌、特别是固氮细菌对植物细胞的定植。

使用最初从墨西哥获得的、已知用于定植植物细胞的Gd菌株来进行的开发工作发现，在对出发菌株进行扩大培养后，菌株的定植特性似乎有所改善。此时菌株的表征揭示了令人惊讶的发现，事实上，存在与Gd密切结合的分离的细菌。这种菌株被表征为土地芽孢杆菌属(Terribacillus)，它是一种形成革兰氏阳性细菌的孢子，并且与嗜糖土地芽孢杆菌(Terribacillus saccharophilus)和嗜盐土地芽孢杆菌(Terribacillus halophilus)紧密相关。

之前已经提出，这种菌株可以用于草莓果实中灰霉病的生物防治(埃斯海尔(Esshaier)等人，应用微生物学杂志(Journal of Applied Microbiology)(2009)106 833-846)中，并且此外它可以增强植物发芽(WO 2014/193746)或具有促进植物生长的活性(WO 2104/201044)。

这两种生物体的共存是非常令人惊讶的，并且实际上被认为是前所未有的。尚不清楚土地芽孢杆菌属如何与Gd菌株以这种方式相结合。土地芽孢杆菌属是以前在日本或印度的土壤中发现的生物体(安善荣(Sun-Young An)等人，国际系统与进化微生物学杂志(Int.J.of Systematic and Evolutionary Microbiology)(2007)，57，51-55，卡戴安(Kadyan)S，等人，世界微生物学与生物技术杂志(World J Microbiol Biotechnol)，2013；29：1597-1610)，并且在一些植物中也作为植物内生细菌(巴威那(Preveena)等人，古代生命科学(Anc.Sci Life)(2013)32(3)：173-7，钱德纳(Chandna)P等人，BCM微生物学(BCM Microbiology)，2014，14：33)。然而，土地芽孢杆菌属似乎可以以这样的方式与植物细胞相互作用，使得它们可以渗透到植物细胞中，从而促进有用的固氮细菌(诸如Gd)的植物定植活性。特别地，土地芽孢杆菌属似乎与固氮细菌(诸如Gd)在聚生体中起作用，以促进进入植物细胞及其定植。

根据本发明，提供了一种用于将植物生长介导实体或物质引入植物细胞中的方法，所述方法包括将所述植物生长介导实体或物质与土地芽孢杆菌属菌株组合施用于植物。

诸位申请人已经发现，由包括SEQ ID NO 1-4中任一个的菌株所例示的土地芽孢杆菌属，特别是嗜糖土地芽孢杆菌或嗜盐土地芽孢杆菌可以定植植物。然而，可以使用其它土地芽孢杆菌属菌株，包括Terribacillus goriensis或Terribacillus aidingensis。定植可以是细胞间定植或其可以进入植物(细胞内定植)。

因此，这些细菌可用于将植物生长介导实体或物质转运到植物中并且甚至转运到植物细胞中。

合适地，植物生长介导物质是影响植物健康或良好状态以及生长特征的任何本领域中所理解的物质。