[发明专利]一种纳米粒子组合物及其抗肿瘤应用

权利要求书

1.一种纳米粒子组合物，其特征在于，所述纳米粒子组合物为聚合物载体和表达治疗基因的质粒自组装而成的纳米粒子；所述聚合物载体为环糊精-聚乙烯亚胺-聚乙二醇-叶酸四元组装式聚阳离子载体；所述表达治疗基因的质粒为包含编码肝细胞生长因子的HGFK1蛋白DNA序列的真核表达质粒。

2.根据权利要求1所述的一种纳米粒子组合物，其特征在于，所述环糊精-聚乙烯亚胺-聚乙二醇-叶酸四元组装式聚阳离子载体的结构式选自式1或式2；所述式1的结构式具体为：

PEI₆₀₀-CyD-PEG-FA；

所述式2的结构式具体为：

PEI₆₀₀-CyD-PEG-FA；

式1和式2中，n为环糊精-聚乙烯亚胺-叶酸-聚乙二醇的单元结构数目，取值范围5-10，m1为聚乙烯亚胺中的仲氨基单元结构数目，取值为4-8，m2为聚乙烯亚胺中的叔氨基单元结构数目，取值为2-5，L为聚乙二醇中氧乙烷单元结构数目，取值范围42-105。

3.根据权利要求1所述的一种纳米粒子组合物，其特征在于，所述表达治疗基因的质粒为phEF1-HTLV-Igk-HGFK1-SV40，通过从人正常肝细胞LO2提取表达人HGFK1的DNA模板后再亚克隆到phEF1-HTLV-Igk-XXX-SV40质粒制得。

4.根据权利要求3所述的一种纳米粒子组合物，其特征在于，所述phEF1-HTLV-Igk-XXX-SV40包括：1)杂交启动子：人延伸因子-1α启动子和人T细胞白血病病毒的5’非转录区序列，见SEQIDNO1，其能在哺乳动物细胞内长期启动调控基因的表达；2)编码分泌表达信号肽IgK链引导序列的DNA序列，见SEQIDNO2；3)编码表达治疗基因DNA序列：内皮抑素DNA序列，见SEQIDNO3；4)猴肾病毒polyA序列：见SEQIDNO4；

SEQIDNO1：GGATCTGCGATCGCTCCGGTGCCCGTCAGTGGGCAGAGCGCACATCGCCCACAGTCCCCGAGAAGTTGGGGGGAGGGGTCGGCAATTGAACCGGTGCCTAGAGAAGGTGGCGCGGGGTAAACTGGGAAAGTGATGTCGTGTACTGGCTCCGCCTTTTTCCCGAGGGTGGGGGAGAACCGTATATAAGTGCAGTAGTCGCCGTGAACGTTCTTTTTCGCAACGGGTTTGCCGCCAGAACACAGCTGAAGCTTCGAGGGGCTCGCATCTCTCCTTCACGCGCCCGCCGCCCTACCTGAGGCCGCCATCCACGCCGGTTGAGTCGCGTTCTGCCGCCTCCCGCCTGTGGTGCCTCCTGAACTGCGTCCGCCGTCTAGGTAAGTTTAAAGCTCAGGTCGAGACCGGGCCTTTGTCCGGCGCTCCCTTGGAGCCTACCTAGACTCAGCCGGCTCTCCACGCTTTGCCTGACCCTGCTTGCTCAACTCTACGTCTTTGTTTCGTTTTCTGTTCTGCGCCGTTACAGATC，SEQIDNO2：ATGGAGACAGACACACTCCTGCTATGGGTACTGCTGCTCTGGGTTCCAGGTTCCACTGGTGAC，SEQIDNO3：CATGAACTGCATCATTGGTAAAGGACGCAGCTACAAGGGAACAGTATCTATCACTAAGAGTGGTATCAAATGTCAGCCCTGGAGTTCCATGATACCACACGAACACAGCTTTTTGCCTTCGAGCTATCGGGGTAAAGACCTACAGGAAAACTACTGTCGAAATCCTCGAGGGGAAGAAGGGGGACCCTGGTGTTTCACAAGCAATCCAGAGGTACGCTACGAAGTCTGTGACATTCCTCAGTGTTAAGAAGTTGAATGCATGACCTGCTAA，SEQIDNO4：AGTTTGCCCTGAGAGACCCAGCAGGCAACTGTGTGCACTTTGTGGCAGAGGAGCAGGACTGAGGATAAGAATTCGCTAGCTCGACATGATAAGATACATTGATGAGTTTGGACAAACCACAACTAGAATGCAGTGAAAAAAATGCTTTATTTGTGAAATTTGTGATGCTATTGCTTTATTTGTGAAATTTGTGATGCTATTGCTTTATTTGTAACCATTATAAGCTGCAATAAACAAGTTAACAACAACAATTGCATTCATTTTATGTTTCAGGTTCAGGGGGAGGTGTGGGAGGTTTTTTAAAGCAAGTAAAACCTCTACAAATGTGGTA。