[发明专利]一种可用于治疗骨转移癌的氧化还原敏感骨靶向胶束

说明书

技术领域

本发明涉及一种新型葡聚糖(DEX)氧化还原敏感骨靶向胶束的设计制备及应用方案。

背景技术

研究发现至少50％的癌症晚期患者会出现骨转移的现象。肿瘤骨转移的发生影响了药物对肿瘤的治疗，增加了患者的疼痛，降低了患者的存活率。由于骨质硬度大、血管分布少、药物渗透性低等特点，传统给药方式很难将药物有效递送至骨转移瘤处。如何有效递送药物，是解决骨转移瘤治疗难题的关键。骨靶向递药系统的提出，为骨转移瘤的治疗带来了曙光。

双膦酸盐类(BPs)对骨的HA具有很高的亲和力。一旦BPs进入体内后，BPs就会被快速从血液循环中清除而吸附到暴露的骨矿物质区域。阿仑膦酸钠(ALN)属于第三代BPs类药物，具有很强的亲骨性，其结构简单，可化学修饰，被广泛用作递药系统中的骨靶向配体。研究表明，对环境响应的递药系统对药物的可控释放起到关键作用。二硫键是一种对谷胱甘肽(GSH)敏感的化学键，在肿瘤细胞内外GSH的含量差别巨大。其中肿瘤细胞内GSH的浓度可达到2-10mM，而肿瘤细胞外GSH的浓度约为2-20μM，浓度几乎相差1000倍。利用二硫键连接的递药系统可以选择性的将药物释放在GSH含量高的肿瘤细胞内，而在血液中可以稳定存在。

葡聚糖(DEX)具有良好的生物相容性和水溶性，已被广泛应用于生物医药领域。基于DEX制备的胶束递药系统，因其具有粒径小、载药力强等特征已被广泛研究。最近的研究还表明基于DEX的胶束在体内循环也具有类似PEG“隐形”的功能。

发明内容

本发明的目的是提供一种可用于治疗骨转移癌的氧化还原敏感骨靶向胶束，可以将更多DOX递送到骨转移瘤处，同时显著降低DOX在正常组织的分布，从而有效提高DOX的抗肿瘤活性，降低其毒副作用，为治疗骨转移癌递药系统的开发提供新思路。

一种可用于治疗骨转移癌的氧化还原敏感骨靶向胶束，其特征是以阿仑膦酸钠(ALN)为骨靶向配基，以分子量5000的葡聚糖(DEX_(5K))为亲水材料，以十四胺(MA)为疏水材料，以3,3二硫二丙酸(DPC)为交联剂合成MA-DEX_(5K)-ALN，以阿霉素(DOX)为模型药物，制备出兼有主动骨靶向及对肿瘤细胞微环境有特异性响应的纳米胶束DOX@MA-DEX_(5K)-ALN。

具体制备方法如下：

(1)二硫二丙酸-阿仑膦酸钠(DPC-ALN)的合成方法

①在20mL的1,4二氧六环中加入2.4mmol的DPC 501.1mg，4.8mmol的EDCI 916.8mg，搅拌30min，然后加入5.0mmol的NHS 575.2mg以及150μL的TEA，继续搅拌活化3h；②在20mL的蒸馏水中加入1.2mmol的ALN 325.6mg，充分溶解后，分三批次缓慢滴加入上述反应液，在反应过程中，缓慢滴加0.2M NaOH使反应液的pH值稳定维持在7.0左右，2小时后继续滴加0.2M NaOH使pH调成9.0，继续反应过夜，反应结束后旋干溶剂，固体用大量二氯甲烷反复润洗三次，甲醇润洗三次，得产物；

(2)二硫二丙酸-十四胺(DPC-MA)的合成方法

在20mL的1,4二氧六环中加入2.4mmol的DPC 500mg，4.8mmol的EDCI 916.8mg，搅拌30min，然后加入5.0mmol的NHS 575.2mg以及150μL的TEA，继续搅拌活化3h，随后在反应液中加入1.3mmol的MA 217.6mg，室温反应12h，TLC监测反应，结束反应后，过柱分离，其中展开剂以体积比计为：二氯甲烷:甲醇＝10:1；

(3)葡聚糖_(5K)-3,3二硫二丙酸-十四胺(DEX_(5K)-DPC-MA)的合成方法

称取一定量的DPC-MA、EDCI、NHS和TEA依次溶于30mL的DMSO中，充分溶解后加入一定量的DEX_(5K)，室温反应12h，结束反应后，过滤反应液，得淡黄色澄清液体，滤液用大量二氯甲烷沉淀，并反复用二氯甲烷清洗沉淀，甲醇润洗沉淀三次，最后将沉淀溶于少量蒸馏水中透析冻干，即得DEX_(5K)-DPC-OA；

(4)十四胺-3,3二硫二丙酸-葡聚糖_(5K)-3,3二硫二丙酸-阿仑膦酸钠(MA-DPC-DEX_(5K)-DPC-ALN)的合成方法