[发明专利]一种非梗阻性无精子症的检测试剂盒

说明书

本申请是申请日为2014年9月2日、申请号为201410444435.5、名称为一种与非梗阻性无精子症相关的遗传标记的申请的分案申请。

技术领域

本申请涉及男性不育症检测领域，尤其涉及非梗阻性无精子症检测领域。

背景技术

全球约有10％-15％的育龄夫妇面临不能生育的问题，其中一半是由于男性不育。原发性无精子症是造成男性不育的一个非常重要的原因，约影响1％的成年男性。男性不育发病因素具有复杂性和多样性的特点，包括疾病、营养不良、内分泌紊乱、基因缺陷和环境因素等，其具体发病机制尚不明确，但从家族病例报道和小鼠模型的研究成果中可以推断遗传因素起了很大作用。近年来，随着现代分子生物学技术的发展，人们已发现近200个基因与男性不育症的发生密切相关；采用基因敲除技术，发现近400个基因与小鼠精子发生密切相关，这些基因的突变、缺失或表达异常，可能是男性不育症发生的重要原因。大多数基因表达异常可使青春期发育受损，随后由于下丘脑-垂体对性腺或其基因有重要促进作用的因子缺乏，最终引起男性不育。剂量敏感的性别反转先天性肾上腺发育不良基因1(Dosage-sensitive sex reversal,adrenal hypoplasia critical region,on chromosome X gene 1,DAX-1)即属于下丘脑-垂体-性腺轴上的基因，其编码的蛋白是核受体家族的成员。DAX-1作为一种转录因子对垂体促性腺细胞和肾上腺皮质的发育起非常重要的作用。

人类DAX-1基因位于X染色体p21，于1994年克隆成功。该基因编码的蛋白由470个氨基酸组成，是核受体家族中的一员，主要在下丘脑、垂体、肾上腺以及性腺中表达，对垂体促性腺细胞和肾上腺皮质的发育起非常重要的作用。越来越多的研究表明先天性肾上腺发育不良(Adrenal hypoplasia congenital,AHC)和低促性腺激素性性功能不全(Hypogonadotropic hypogonadism,HH)的发病与DAX-1突变有关。由于DAX-1基因位于Xp上的DSS区，当该区双拷贝时常伴有46，XY男性的性反转(女性化)，所以起初DAX-1被认为是卵巢决定基因。但是，随后的条件敲除研究结果表明它在调节精子发生中起重要作用，敲除后的雄性小鼠表现为性腺机能减退、睾丸发育异常、生精障碍等。Holter等人的研究表明，雄激素受体(Androgen receptor,AR)是DAX-1的一个新的作用靶点，DAX-1通过与AR直接相互作用抑制AR的转录活性。

发明内容

本发明提供一种与非梗阻性无精子症相关的遗传标记。

本发明提供一种与非梗阻性无精子症相关的遗传标记，其核苷酸序列是DAX-1基因的序列，所述序列的突变位点选自c.152G>A、c.312C>G、c.725C>T、c.766G>C、c.1153G>T、c.1279A>G和c.162G>A中的一个或多个。

前6个突变是错义突变，第7个突变是同义突变。

上述突变分别是在DAX-1基因序列的第152位点、312位点、725位点、766位点、1153位点、1279位点和162位点。

一种与非梗阻性无精子症相关的遗传标记，其核苷酸序列是DAX-1基因的序列，所述序列的突变位点选自c.152G>A、c.312C>G、c.725C>T、c.766G>C、c.1153G>T和c.1279A>G中的一个或多个。

所述突变位点是c.1153G>T。

检测所述的遗传标记的引物对，选自primer 1、primer 2、primer 3或primer 4引物对，其中，所述primer 1引物对的上游引物的序列如SEQ ID NO:1所示，其下游引物的序列如SEQ ID NO:2所示；所述primer 2引物对的上游引物的序列如SEQ ID NO:3所示，其下游引物的序列如SEQ ID NO:4所示；所述primer 3引物对的上游引物的序列如SEQ ID NO:5所示，其下游引物的序列如SEQ ID NO:6所示；所述primer 4引物对的上游引物的序列如SEQ ID NO:7所示，其下游引物的序列如SEQ ID NO:8所示。