[发明专利]检测牛ADIPOQ基因mRNA表达水平的特异性引物和荧光定量检测试剂盒

权利要求书

1.检测牛ADIPOQ基因mRNA表达水平的特异性引物，其特征在于：所述特异性引物的核苷酸序列为：

上游引物序列为：5’-AGAAAGGGAGAACCTGGAGA-3’；

下游引物序列为：5’-GGTAAAGCGAATGGGAACA-3’。

2.一种牛ADIPOQ基因mRNA表达水平的荧光定量PCR检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括特异性引物，所述特异性引物序列为：

上游引物序列为：5’-AGAAAGGGAGAACCTGGAGA-3’；

下游引物序列为：5’-GGTAAAGCGAATGGGAACA-3’。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括SYBR Green染料。

4.根据权利要求2或3所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括阳性对照和阴性对照。

5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于：所述阳性对照的核苷酸序列参见序列表中SEQ ID No.3。

6.权利要求2-5任一所述的试剂盒的使用方法，其特征在于：是以待测cDNA为模板，利用权利要求1所述的特异性引物和SYBR Green染料进行实时荧光定量PCR，记录Ct值，并以ADIPOQ标准基因作为阳性对照绘制标准曲线，据此标准曲线和Ct值进行定量测定。

7.根据权利要求6所述的使用方法，其特征在于：所述实时荧光定量PCR的反应条件是：95℃预变性30秒；95℃ 5秒，56.0℃ 20秒，捕捉荧光信号，循环40次。

8.一种牛ADIPOQ基因mRNA表达水平的定量检测方法，其特征在于：是以待测cDNA为模板，利用权利要求1所述的特异性引物和SYBR Green染料进行实时荧光定量PCR，记录Ct值，并以ADIPOQ标准基因作为阳性对照绘制标准曲线，据此标准曲线和Ct值进行定量测定。

9.根据权利要求8所述的使用方法，其特征在于：所述实时荧光定量PCR的反应条件是：95℃预变性30秒；95℃ 5秒，56.0℃ 20秒，捕捉荧光信号，循环40次。

10.权利要求1所述的特异性引物、权利要求2-5任一所述的试剂盒、序列表中SEQ ID No.3所述的核苷酸序列在定量检测牛ADIPOQ基因mRNA表达水平中的应用；优选地，所述牛为黄牛、奶牛和牦牛。