[发明专利]鉴定节瓜枯萎病的方法及引物对的应用

权利要求书

1.特异性扩增引物对em5me1在鉴定节瓜枯萎病方面的应用，所述em5me1分别如SEQ ID No.1和No.14所示，具体为：

No.1：tgagtccaaa ccggata，

No.14：gactgcgtac gaattaac。

2.采用SRAP分子标记技术鉴定节瓜枯萎病的方法，其特征在于，采用特异性扩增引物对，在PCR扩增体系中扩增节瓜枯萎病的基因组DNA，将所得PCR产物进行电泳检测；

其中，所述特异性扩增引物对为em5me1，所述em5me1如权利要求1所述；

将利用SRAP分子标记筛选与枯萎病相关的分子标记em5me1引物对应用到田间强雌系材料和近年选育的品种进行枯萎病鉴定。

3.根据权利要求2所述的采用SRAP分子标记技术鉴定节瓜枯萎病的方法，其特征在于，所述PCR扩增体系为25ul，其中，PCR-buffer是2.5ul，Mg²⁺是2.0ul，dNTPs是0.5ul，Taq DNA聚合酶是0.3ul，DNA是4ul，引物对是2ul，H₂O是13.7ul。

4.根据权利要求3所述的采用SRAP分子标记技术鉴定节瓜枯萎病的方法，其特征在于，所述引物对浓度为0.5-2.5μM，Taq DNA聚合酶浓度为0.5-1.5U/25ul，Mg²⁺浓度为0.5-2.5mM，dNTPs浓度为0.1-1.0mM，DNA浓度为5-40ng/25ul。

5.根据权利要求3所述的采用SRAP分子标记技术鉴定节瓜枯萎病的方法，其特征在于，所述引物对浓度为1.0μM，Taq DNA聚合酶浓度为1.0U/25ul，Mg²⁺浓度为2.5mM，dNTPs浓度为0.5mM，DNA浓度为20ng/25ul。