[发明专利]末端侧链-尾链连接手性二酸修饰多肽化合物及合成方法

说明书

本发明公开了一种含有末端侧链‑尾链连接手性二酸修饰的多肽化合物及其合成方法，其结构式如式(Ⅰ)所示：本发明的多肽的合成方法包括如下步骤：(1)含有手性二酸的多肽的固相合成；(2)用钯催化剂同时脱去二酸保护基Allyl(烯丙基)和氨基保护基Alloc(烯丙氧羰基)；(3)在六氟磷酸苯并三唑‑1‑基‑氧基三吡咯烷基磷/1‑羟基苯并三唑条件下分子内酰胺基关环，获得多肽；(4)将步骤(3)的多肽从固相切下，经分离纯化获得含有末端侧链‑尾链连接手性二酸修饰多肽，并通过圆二色谱等方法评价验证多肽的螺旋性，用荧光显微镜成像评价多肽的穿膜性。本发明的多肽及其合成方法成本低、简单高效，对于稳定多肽α‑螺旋，提高其成药性有重要意义。

技术领域：

本发明属于化学生物学稳定多肽方法学领域，具体涉及一种含有末端侧链-尾链连接手性二酸修饰的多肽化合物及其合成方法。

背景技术：

多肽类药物由于其相对于小分子更强的生物分子识别能力，极高的分子进化潜能等特点越来越引起医药行业的关注。但同时多肽类药物存在生物利用度低，难以作用于胞内靶点，组织穿透性差等缺点。

统计数据表明α-螺旋大约占蛋白质结构的近30％，这种二级结构在蛋白质与其它生物分子的识别过程中起关键作用，故α-螺旋在生物医药领域有很高的开发前景。然而，截取自天然蛋白的短肽因为接合面减少造成的焓损失以及难以折叠带来的较高的熵罚难以与靶点有效的结合，加上其易被降解使之成药性很低。

自上世纪八九十年代以来，化学生物学家开始尝试利用各种化学手段来稳定或直接模拟α螺旋。其中稳定方法包括利用各种化学(二硫键、酰胺键、酰胺键、烯烃复分解等)共价或者非共价连接侧链，或者利用末端修饰成核诱导螺旋。稳定螺旋可以提高短肽与靶点结合的能力、稳定性以及穿透细胞膜的能力。

上述稳定方法各有不同程度的缺陷。除了一些方法(离子键、二硫键)在稳定性上的缺陷，侧链-侧链连接对多肽与靶点结合的影响难以预测，导致筛选成本增加。基于末端修饰成核诱导螺旋的氢键替代策略需要较为繁琐的氮烷基化模块的构建等等。

发明内容：

本发明的目的是提供一种含有末端侧链-尾链连接手性二酸修饰的多肽化合物，该含有手性二酸修饰的多肽化合物，具有稳定的α-螺旋结构。本发明的另一目的是提供该多肽化合物的合成方法。本发明的末端手性二酸可以有效的稳定短肽螺旋，提高多肽稳定性。同时该方法原料廉价，合成简便高效。该方法还具有序列耐受性好、拥有额外修饰位点等优点。

为了实现上述目的，本发明采用如下的技术方案：

本发明首先提供一种含有末端侧链-尾链连接手性二酸修饰的多肽化合物，其结构通式如式(Ⅰ)所示：

其中，R为任意氨基酸残基，n为1～2的正整数，R₁、R₂连接的碳原子至少一个为手性碳原子，且R₁、R₂各自独立地选自氢、烷基、氨基或其衍生物取代基和羟基或其衍生物取代基中的一种。

本发明中，所述的手性二酸选自酒石酸或其衍生物、谷氨酸或其衍生物和天冬氨酸或其衍生物中的一种。

本发明中，所述的手性二酸为L型酒石酸或其衍生物。

本发明中，所述的手性二酸为手性中心位于N端β位的乙酰化天冬氨酸或其衍生物。

本发明中，所述多肽的长度大于或等于5个氨基酸。

本发明中，所述R为L型氨基酸或D型氨基酸。

本发明中，所述R为α氨基酸或β氨基酸。

本发明中，所述n为1。

本发明还提供了一种含有末端侧链-尾链连接手性二酸修饰的多肽化合物的合成方法，所述方法包括如下步骤：