[发明专利]酪酸菌发酵培养基及其制备方法与酪酸菌培养发酵方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物工程技术领域，尤其是酪酸菌发酵培养基及其制备方法与酪酸菌培养发酵方法。

背景技术

微生态制剂在替代抗生素、防治疾病和改善环境等方面起到了积极作用，但目前广泛应用的活菌制剂普遍存在保存期短、活性不稳定等缺点，这个问题在微生态制剂实际应用带来很多困难。

酪酸菌作为益生菌，能促进肠道内有益菌共生并促进有益菌的增殖和发育促进生长功能。酪酸菌内存在着蛋白酶Ⅰ和蛋白酶Ⅱ及脂肪酶，其能促进人和对脂肪和蛋白质的消化吸收。酪酸菌还具有氨基酸载体的作用，能转运所有的氨基酸。酪酸菌同其它需氧芽孢杆菌一样在消化道内复活发育的过程中产生活性很强的胞外酶----脂肪酶、淀粉酶、糖苷酶等多种酶类，酪酸菌在发酵过程中能产生葡萄糖、麦芽糖等6种糖，及维生素E。酪酸菌能激活免疫系统，促进免疫功能，维持机体的健康状况，它在体内能产生B族维生素、维生素K等，对机体具有保健作用，同时其主要代谢产物丁酸是肠道上皮组织细胞再生和修复的主要营养物质。一种集乳酸菌和芽孢杆菌优点于身的活菌制剂，有更强的耐酸、耐胆汁特性，能更适应人和动物肠道环境，具有很大的应用在临床和实际应用上面。

在益生菌酪酸菌发酵培养基中，目前培养基常用的氮源是蛋白胨，大豆蛋白胨，胰蛋白胨或者牛肉膏单个或者复合氮源，盐类一般添加硫酸锰，硫酸镁等离子，这些物质成本较高，且组成成分复杂，有时解决不好菌体生长稳定的问题，发酵时间长，若能采用来源广泛且便宜的氮源碳源代替以上物质，简化培养基组分，则能降低酪酸菌发酵的成本，提高菌体发酵稳定性，尤其对工业化生产意义更为重大。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于提供一种酪酸菌发酵培养基。

本发明所要解决的另一技术问题在于提供上述酪酸菌发酵培养基的制备方法。

本发明所要解决的另一技术问题在于提供一种应用上述酪酸菌发酵培养基进行酪酸菌培养发酵的方法。

为解决上述技术问题，本发明的技术方案是：

一种酪酸菌发酵培养基，由氮源、碳源和氯化钠组成，其中，所述氮源为鱼粉、豆粕或酵母膏的一种或任意组合，碳源为葡萄糖和/或玉米粉，按其重量份数计氮源20-35份、碳源10-20份和氯化钠4-7份。

优选的，上述酪酸菌发酵培养基，所述鱼粉、玉米粉和豆粕在使用前，粉碎至80目。

优选的，上述酪酸菌发酵培养基，所述氮源为鱼粉、豆粕和酵母膏，碳源为葡萄糖，按其重量份数计鱼粉20份，豆粕10份，酵母膏0.5份，葡萄糖10份，氯化钠5份。

优选的，上述酪酸菌发酵培养基，所述氮源为豆粕和酵母膏，碳源为葡萄糖和玉米粉，按其重量份数计豆粕15份，酵母膏15份，葡萄糖7份，玉米粉12份，氯化钠6份。

优选的，上述酪酸菌发酵培养基，所述氮源为豆粕和酵母膏，碳源为葡萄糖，按其重量份数计豆粕12份，酵母膏12份，葡萄糖10份，氯化钠6份。

上述酪酸菌发酵培养基的制备方法，具体步骤如下：

（1）按重量份数称取氮源20-35份、碳源10-20份、氯化钠4-7份；

（2）氮源水煮或者酶解后加入碳源和氯化钠，调整pH至7.4-7.5，其余用去离子水补足到1L；

（3）高压蒸汽灭菌培养基121℃20min。

优选的，上述酪酸菌发酵培养基的制备方法，其中氮源含有动物蛋白时，例如来源为鱼粉时，植物蛋白，例如来源豆粕可以水煮；若没有动物蛋白，例如鱼粉时，可将豆粕酶解，提供全面的可吸收的营养物质。

优选的，上述酪酸菌发酵培养基的制备方法，所述步骤（1）中鱼粉、豆粕在使用前粉碎至80目。

优选的，上述酪酸菌发酵培养基的制备方法，具体步骤如下：

（1）所述的发酵培养基按g/L计为鱼粉20，豆粕10，酵母膏0.5，葡萄糖10，氯化钠5进行称取；

（2）培养基配置前，豆粕经过水煮沸30min，10层纱布过滤，过滤液添加到培养基中去；

（3）过滤液中，依次称量加入其余培养基组分，用去离子水溶解，调整pH为7.5。

优选的，上述酪酸菌发酵培养基的制备方法，具体步骤如下：

（1）所述的发酵培养基按g/L计为豆粕15，酵母膏15，葡萄糖7，玉米粉12，氯化钠6进行称取；

（2）培养基配置前，每1g豆粕加水10mL混匀成水溶液，按添加量1%的50000U/g中性蛋白酶加入水溶液，再40℃酶解4.5h；

（3）酶解后，依次称量加入其余培养基组分，用去离子水溶解，调整pH为7.4。