[发明专利]从血液中分离循环肿瘤细胞的方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物与医学检测，涉及一种从混合细胞群体中分离稀有细胞的方法，特别涉及一种从血液样品中分离循环肿瘤细胞的方法。

背景技术

稀有细胞是指生物样本中存在的数量稀少却具有重要生物学功能或临床检测意义的细胞，如人外周血中的循环肿瘤细胞、循环内皮细胞、被病毒感染的细胞，以及实体肿瘤中的肿瘤干细胞等。由于稀有细胞数量极其稀少，对其检测犹如大海捞针，而对其进一步的分析就更加困难，因此急需发展能够高效、快速的将稀有细胞从复杂生物样本中分离出来的方法与工具。

人外周血中的循环肿瘤细胞(CTC)是一类具有代表性的稀有细胞，它是指自发或因诊疗操作由肿瘤病灶播散进入外周血循环的肿瘤细胞，并在一定条件下可发展为肿瘤转移性病灶(Racila E，Euhus D，Weiss AJ，et al.Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.1998，95，4589-4594；Pantel K，Brakenhoff RH，Nat.Rev.Cancer2004，4，448-456；Zhe XN，Cher ML，Bonfil RD，Am.J.Cancer Res.2011，1，740-751；Butler TP，Gullino PM，Cancer Res.1975，35，512-516)。由于超过90％的癌症死亡是由转移造成的(Mehlen P，Puisieux A，Nat.Rev.Cancer2006，6，449-458)，而循环肿瘤细胞是肿瘤转移灶的直接来源(Dawood S，Cristofanilli M，Curr.Treat Options Oncol.2007，8，89-95；Fidler IJ，Nat.Rev.Cancer2003，3，453-458)，因此从血液中检测循环肿瘤细胞越来越引起人们的重视。目前已有证据显示检测外周血中的循环肿瘤细胞数目可用于实体瘤患者的预后以及预测化疗的有效性，包括乳腺癌(Cristofanilli M，BuddT,Ellis MJ，et al.N.Engl.J.Med.2004，351，781-791；Smerage JB，Hayes DF，Cancer Invest.2008，26，109-114)、前列腺癌(Moreno JG,Miller MC，Gross S，et al.Urology2005，65，713-718；De Bono JS，Scher HI，Montgomery RB，et al.Clin.Cancer Res.2008，14，6302-6309；Scher HI，Jia XY, De Bono JS，et al.Lancet Oncol.2009，10，233-239)、结肠癌(Sastre J，Maestro ML，Puente J，et al.Ann.Oncol.2008，19，935-938)、肾细胞癌(Bluemke K，Bilkenroth U，MeyeA，et al.Cancer Epidemiol.Biomarkers Prev.2009，18，2190-2194)，黑色素瘤(Palmieri G, Satriano SM，Budroni M，et al.BMC Cancer.2006，6，266；Mocellin S，Hoon D，Ambrosi A，et al.Clin.Cancer Res.2006，12，4605-4613)等。进一步运用循环肿瘤细胞负荷作为潜在预测指标来指导实体瘤患者的病程分期和复发监控已成为癌症研究中一个活跃而重要的课题(Pachmann K，Dengler R,Lobodaseh K，et al.J.Cancer Res.Clin Oncol，2008，134，59-65)。