[发明专利]一种萜类化合物及其制备方法和用途

说明书

技术领域

本发明涉及一种萜类化合物及其制备方法和用途。

背景技术

益母草在《神农本草经》中被列为上品，原名茺蔚。在《本草纲目》中被称之为“血家之圣药”，主治“胎漏难产，胎衣不下，血晕，血风，血痛，崩中漏下，尿血”等症。根据现代研究，益母草中主要含有生物碱、二萜、黄酮、环烯醚萜苷、苯丙醇苷、挥发油、肽类和脂肪酸类等成分,目前活性研究较多的主要是生物碱和二萜类：

（1）生物碱：主要包括水苏碱、益母草碱、益母草啶和益母草宁等。现代研究表明益母草总生物碱对脑缺血再灌注损伤有治疗作用，其中，益母草碱不仅可通过抗氧化作用保护缺血损伤的心肌细胞，还具有神经保护活性。

（2）二萜：近年来对其活性成分研究增多，其中Leoheteronin A和Leopersin G明显抑制乙酰胆碱酯酶活性，在治疗阿尔茨海默病方面有很好的前景；prehispanolone为一种血小板拮抗因子，可抑制血小板聚集；leojaponin对谷氨酸盐损伤的大脑皮层细胞有保护作用；Khan得到的半日花烷型二萜具有抗炎作用等。

随着现代科学技术的进步，人们对益母草的物质基础不断深入，对其活性成分的研究也迅速开展。由于益母草不仅具有“活血”作用，而且还具有“止血”作用，其传统功效与调节凝血功能密切相关，但目前针对此类成分的研究不多，未能很好地阐明益母草的药效物质基础，严重影响了进一步的开发和应用。因此，从益母草中获得的增强凝血功能的活性成分具有很好的前景和研究价值。

发明内容

本发明的目的在于提供一种萜类化合物及其制备方法和用途。

本发明提供了式I所示的萜类化合物或其药学上可接受的盐、酯或水合物：

R₁选自H、R₂为C1～C4的烷基。

进一步地，结构式如式下：

更进一步地，所述R₂选自甲基、乙基、正丙基或异丙基。。

优选地，所述R₂为甲基。

进一步优选地，所述结构式如下：

本发明还提供了上述式III化合物的制备方法，它包括如下操作步骤：

（1）称取益母草，粉碎，90～95%v/v乙醇或无水乙醇提取，提取液合并后，减压回收溶剂，即得乙醇浸膏；

（2）取乙醇浸膏水-乙酸乙酯系统萃取，收集乙酸乙酯部分，减压回收溶剂，得乙酸乙酯浸膏；

（3）取乙酸乙酯浸膏上硅胶柱色谱，以石油醚-丙酮=(100:1)～(0:1)梯度洗脱，取石油醚-丙酮=8:1v/v洗脱部分上反相聚苯乙烯型树脂柱，以50～100%v/v甲醇水溶液梯度洗脱，收集的75～85%v/v甲醇洗脱部分上葡聚糖凝胶柱，以石油醚-氯仿-甲醇=5:5:1洗脱，薄层追踪，收集含有目标化合物的洗脱液，回收溶剂，剩余物再经制备薄层色谱或反相液相制备色谱纯化即得。

进一步地，所述反相聚苯乙烯型树脂柱的树脂型号为CHP20P；所述葡聚糖凝胶柱的树脂型号为Sephadex LH-20。

进一步地，步骤（1）中，乙醇浓度为95%v/v；步骤（3）中，以50～100%v/v甲醇水溶液梯度洗脱后，收集80%v/v甲醇洗脱部分。

进一步地，所述制备薄层色谱的分离展开剂为石油醚-乙酸乙酯=5:1；所述反相液相制备色谱的流动相为85%v/v甲醇水溶液。

本发明所述的式I化合物，可以通过式III化合物水解或置换酯键得到。

本发明所述的式I～式III化合物的盐、酯或水合物，均可以通过公知的成盐、成酯或水合结晶方式得到。

本发明还提供了上述萜类化合物或其药学上可接受的盐、酯或水合物在制备增强凝血功能的药物中的用途。

进一步地，所述药物是缩短凝血酶原时间、活化部分凝血酶原时间和凝血酶时间，增加血液中血纤蛋白原量的药物。

本发明从益母草中分离得到的降碳二萜类新化合物，为首次从自然界获得的降碳半日花烷型二萜，在体外能明显缩短凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血酶原时间（APTT）和凝血酶时间（TT），而且还能明显增加血液中血纤蛋白原（FIB）的量，对凝血功能具有一定的增强作用，为新颖的天然凝血止血药物的开发提供了新的选择。

附图说明

图1化合物主要的¹H,¹H-COSY相关信号（粗线所示）和HMBC相关信号（箭头所示）

图2化合物主要的NOESY相关信号