[发明专利]发酵制备高纯度赖氨酸盐的方法及其产品

权利要求书

1.发酵制备含L-赖氨酸硫酸盐的产品的方法，其包括：

（1）将编码氨基酸序列如SEQ ID No：1所示的蛋白或其变体的多核苷酸导入产L-赖氨酸的菌；

（2）在发酵条件下液体培养步骤（1）获得的菌，并收集培养的上清液，所述上清液中包含如下重量配比的氨基酸：

赖氨酸51~55份，优选为51.5~53.5份；

天冬氨酸1.2~1.8份，优选为1.45~1.6份；

苏氨酸0.8~1.1份，优选为0.9~1份；

丝氨酸0.4~0.65份，优选为0.5~0.6份；

谷氨酸2~3份，优选为2.2~2.6份；

甘氨酸0.75~1.1份，优选为0.85~1份；

丙氨酸1.2~1.6份，优选为1.3~1.5份；

缬氨酸0.75~1.1份，优选为0.85~1份；

甲硫氨酸0.3~0.5份，优选为0.35~0.48份；

异亮氨酸0.45~0.75份，优选为0.55~0.65份；

亮氨酸1~1.5份，优选为1.2~1.35份；

酪氨酸0.5~0.8份，优选为0.6~0.75份；

苯丙氨酸0.5~0.8份，优选为0.6~0.7份；

组氨酸0.8~1.2份，优选为0.9~1.05份；和，

精氨酸，0.9~1.3份，优选为1~1.2份；

（3）取通过步骤（2）制备的上清液，进行纯化，得到赖氨酸纯度提高的级份，优选级份中赖氨酸纯度提高至75~95%（w/w），更优选为76~92.6%（w/w），更加优选为78~83%（w/w），最优选为80.7%（w/w）；

（4）另取通过步骤（2）制备的上清液，加入硫酸，并任选进行浓缩，得到酸化的上清液；和

（5）将步骤（3）获得的级份加入硫酸，并喷入干燥机，在干燥机内形成颗粒核心，而后向该干燥机喷入步骤（4）获得的酸化的上清液，包裹上述颗粒核心，然后干燥至含水率小于3%（w/w）。

2.权利要求1所述的方法，其中纯化是层析纯化，优选是凝胶过滤层析纯化，更优选是Sephadex G-10层析纯化。

3.权利要求1所述的方法，其中，步骤（3）中所取的通过步骤（2）制备的上清液与步骤（4）中所另取的通过步骤（2）制备的上清液的体积比为0.5~1.5：2~4，优选为0.75~1.25：2.5~3.5，更优选为1：3。

4.权利要求1所述的方法，其中，所述菌是大肠杆菌，更优选是对L-赖氨酸反馈抑制脱敏的大肠杆菌，最优选是表达对L-赖氨酸反馈抑制脱敏的二氢吡啶二羧酸合成酶的大肠杆菌。

5.含L-赖氨酸硫酸盐的颗粒（其优选是饲料添加剂颗粒），其包括颗粒核心和包裹该核心的外层，其中颗粒核心的L-赖氨酸含量为60~72%（w/w），优选为61~70.6%（w/w），更优选为62~65%（w/w），最优选为63.5%（w/w），外层的L-赖氨酸含量为51~55%（w/w），优选为51.5~53.5%（w/w），更优选为52.3%（w/w）。

6.权利要求5所述的颗粒，其含水率小于5%（w/w），优选小于3%（w/w），更优选小于2.5%（w/w）。

7.权利要求5所述的颗粒，其是由权利要求1~4之任一所述的方法制备的。

8.含L-赖氨酸硫酸盐的颗粒核心（其优选是饲料添加剂颗粒核心）在制备含水率小于5%（w/w）（优选小于3%（w/w），更优选小于2.5%（w/w））的含L-赖氨酸硫酸盐的饲料添加剂（优选是权利要求5~7之任一所述的颗粒）中的应用，其中所述含L-赖氨酸硫酸盐的颗粒核心的L-赖氨酸含量为60~72%（w/w），优选为61~70.6%（w/w），更优选为62~65%（w/w），最优选为63.5%（w/w）。

9.权利要求8所述的应用，其中所述含L-赖氨酸硫酸盐的颗粒核心是由权利要求1~4之任一所述的方法的步骤（1）、（2）、（3）和（5）制备的。

10.含L-赖氨酸硫酸盐的颗粒核心（其优选是饲料添加剂颗粒核心）在作为颗粒核心中的应用，其中所述含L-赖氨酸硫酸盐的颗粒核心的L-赖氨酸含量为60~72%（w/w），优选为61~70.6%（w/w），更优选为62~65%（w/w），最优选为63.5%（w/w）。