[发明专利]爆裂玉米幼胚愈伤组织诱导和植株再生的方法

权利要求书

1.爆裂玉米幼胚愈伤组织诱导和植株再生的方法，其特征在于，先将玉米自交系幼胚诱导出愈伤，经两次继代，选取其中玉米胚型愈伤组织，直接再生成完整植株，所述玉米自交系为N10或N04，它的步骤如下：

（1）取人工自交授粉后10-11天的玉米幼穗灭菌处理后，在超净工作台中拨取幼胚，胚轴朝下放在诱导培养基上，诱导出第一次玉米愈伤组织；

（2）由步骤（1）得到的第一次玉米愈伤组织切去胚芽转移到新的诱导培养基上，15天后得到第二次玉米愈伤组织；

（3）由步骤（2）得到的第二次玉米愈伤组织夹碎后转移到新的诱导培养基上，每隔15天继代一次，继代两次，得到玉米胚型愈伤组织；

（4）由步骤（3）得到的玉米胚型愈伤组织转移到分化培养基上得到玉米丛生苗；

（5）将步骤（4）得到的玉米丛生苗分成单个苗，转入生根培养基中再生成完整植株。

2.根据权利要求1所述的爆裂玉米幼胚愈伤组织诱导和植株再生的方法，其特征在于：所述步骤（1）、步骤（2）、步骤（3）中N04的诱导培养基是：MS基本培养基4 g/L +N6维生素1 ml + 2,4-D  0.4 mg/L + L-脯氨酸5 g/L + 蔗糖30 g/L + 肌醇0.1 g/L + 水解酪蛋白0.1 g/L + AgNO₃  36μM/L + 植物凝胶3 g/L，pH为5.8。

3.根据权利要求1所述的爆裂玉米幼胚愈伤组织诱导和植株再生的方法，其特征在于：所述步骤（1）、步骤（2）、步骤（3）中N10的诱导培养基是：MS基本培养基4 g/L +N6维生素1ml + 2,4-D 2 mg/L + L-脯氨酸2.76 g/L + 蔗糖30 g/L + 肌醇0.1 g/L + 水解酪蛋白0.1 g/L+ AgNO₃  13 μM/L + 植物凝胶3 g/L，pH为5.8。

4.根据权利要求1所述的爆裂玉米幼胚愈伤组织诱导和植株再生的方法，其特征在于：所述步骤（4）中的分化培养基是：MS基本培养基4 g/L + 肌醇0.1 g/L + 蔗糖30 g/L + 6-BA  0.2 mg/L + 植物凝胶3 g/L，pH为5.8。

5.根据权利要求1所述的爆裂玉米幼胚愈伤组织诱导和植株再生的方法，其特征在于：所述步骤（5）中生根培养基是：MS基本培养基4 g/L + 肌醇0.1 g/L + 蔗糖30 g/L + NAA 0.2 mg/L + 植物凝胶30 g/L，pH为5.8。