[发明专利]一种半胱氨酸的检测试剂及检测方法

说明书

技术领域

本发明属于生物小分子的检测领域，具体涉及一种能够快速、简便、灵敏的识别出水溶液中半胱氨酸的检测方法。

背景技术

在天然氨基酸中，半胱氨酸是唯一一种含有巯基的氨基酸，在生物体及某些植物体中起着重要的作用。例如，在生物体中半胱氨酸缺乏时，将会导致生长缓慢，头发无光泽，发生水肿，肝脏，皮肤损伤及身体虚弱等症状。因此对于半胱氨酸的检测具有重要的意义。而目前传统的半胱氨酸检测方法主要有高效液相层析、电化学、化学发光法、分光光度法等，这些方法都依赖于氧化还原法，或者得到发光基团，或者荧光基团，并且借助相关的大型精密仪器设备进行检测，而这些方法操作繁琐，成本花费高且耗时长。

文献“Selectively colorimetric detection of cysteine with triangular silver nanoprisms”中，采用的是半胱氨酸的巯基直接和银片作用，形成银硫键，长时间的反应使银原子从银片上剥落下来，其形貌发生改变，达到检测半胱氨酸的目的。但是该反应常温下反应时间长，需要水浴加热，促使反应的进行，并且其比色灵敏度为160nM高于本发明的方法(如图1所示，比色灵敏度为25nM)。

因此，本领域尚缺乏一种能够快速、及时、简便、准确地检测出水溶液中低浓度的半胱氨酸方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种能够快速、及时、简便、准确地检测出水溶液中低浓度的半胱氨酸的试剂盒及检测方法。

本发明的第一方面，提供了一种用于检测半胱氨酸的试剂，所述的试剂包含银纳米片溶液；其中，所述的银纳米片溶液中含有保护剂。

在另一优选例中，所述溶液中，银纳米片的浓度为3nM-100nM。

在另一优选例中，所述溶液中，银纳米片的浓度为15nM-25nM。

在另一优选例中，所述的保护剂选自下组：柠檬酸、柠檬酸盐聚乙烯吡咯烷酮、可溶性的(对-磺酰苯基)苯基膦化盐，或其组合。

在另一优选例中，所述的保护剂包括选自下组(a)和选自下组(b)的保护剂：

(a)柠檬酸、柠檬酸盐，或其组合；

(b)聚乙烯吡咯烷酮、可溶性(对-磺酰苯基)苯基膦化盐，或其组合。

在另一优选例中，所述的柠檬酸盐是柠檬酸碱金属盐，较佳地，所述的柠檬酸盐选自下组：柠檬酸钾、柠檬酸钠，或其组合。

在另一优选例中，所述的可溶性(对-磺酰苯基)苯基膦化盐选自下组：碱金属盐、碱土金属盐，或其组合。

在另一优选例中，所述的试剂的pH值为3-10。

在另一优选例中，所述试剂的pH值为4-9，较佳地为5-8。

本发明的第二方面，提供了一种用于检测半胱氨酸的试剂盒，所述的试剂盒包括如本发明第一方面所述的试剂；或

所述的试剂盒包括组分：

(i)银纳米粒子前驱体；

(ii)还原性试剂；和

(iii)保护剂。

在另一优选例中，所述的银纳米粒子前驱体是可溶性银盐。

在另一优选例中，所述的还原性试剂为可溶性硼酸盐，或其水溶液，其中，所述的可溶性硼酸盐优选硼氢化钠、硼氢化钾，或其组合。

在另一优选例中，所述的保护剂选自下组：柠檬酸、柠檬酸盐、聚乙烯吡咯烷酮、可溶性的(对-磺酰苯基)苯基膦化盐，或其组合。

在另一优选例中，所述的保护剂包括选自下组(a)和选自下组(b)的保护剂：

(a)柠檬酸、柠檬酸盐，或其组合；

(b)聚乙烯吡咯烷酮、可溶性(对-磺酰苯基)苯基膦化盐，或其组合。

在另一优选例中，所述的柠檬酸盐是柠檬酸碱金属盐，较佳地，所述的柠檬酸盐选自下组：柠檬酸钾、柠檬酸钠，或其组合。

在另一优选例中，所述的可溶性(对-磺酰苯基)苯基膦化盐选自下组：(对-磺酰苯基)苯基膦化碱金属盐、(对-磺酰苯基)苯基膦化碱土金属盐，或其组合。

在另一优选例中，所述的试剂盒还包括：含有碘离子的溶液。

在另一优选例中，所述的含有碘离子的溶液为碘化钾溶液。

在另一优选例中，所述的试剂盒还包括pH调节试剂。

在另一优选例中，所述的pH调节试剂是强酸和/或强碱，较佳地，所述的pH调节试剂选自下组：氢氧化钠、氢氧化钾、硫酸、硝酸。

本发明的第三方面，提供了一种检测待测样品中的半胱氨酸的方法，所述方法包括：用如本发明第一方面所述的试剂，或如本发明第二方面所述的试剂盒对样品进行检测。