[发明专利]一种检测雌激素硫酸转移酶活性的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种检测雌激素硫酸转移酶活性的新技术领域。通过检测组织(胎盘、肿瘤等)、血液和尿中的雌激素硫酸转移酶（SULT1E1）活性，可作为自然流产、乳腺癌、子宫内膜癌、卵巢癌等的预警和辅助诊断指标。 

背景技术

雌激素（estrogen，E2）的代谢则主要通过硫酸化途径完成，可将雌激素转化为硫酸化的雌激素（E2-S）。雌激素硫酸转移酶（Estrogen sulfotransferase，EST）是雌激素硫酸化反应的关键酶。人体内能催化雌激素硫酸化的关键酶SULT主要包括SULT1E1，SULT1A1，SULT1A3和SULT2A1。其中SULT1E1对雌激素的亲和力最强，是关键的雌激素硫酸转移酶。近年的研究证明，SULT1E1通过雌激素的硫酸化使雌激素失活，而甾体硫酸酯酶（Steroid sulfatase，STS）使E2-S水解为雌激素。因此，E2-S被认为是具有生物活性雌激素的前体，参与机体雌激素水平的调节。 

自然流产与SULT1E1：我国育龄妇女中不孕和自然流产发生率逐年上升。据“2010中国不孕不育现状调研报告”显示，我国自然流产率达15%，死胎率（孕20周之后发生的胎儿死亡）达到15%～20%。妊娠第20-42周，胎盘产生大量的SULT1E1，使卵巢分泌的雌激素转化成E2-S。与雌激素相比，E2-S容易通过胎盘屏障进入胎儿体内，经STS作用再还原成游离雌激素。雌二醇能刺激合成促肾上腺皮质激素（ACTH）和促甲状腺激素（TSH），促进胎儿的成长和脑的发育。此外，随着工业化进程的不断加快，我国环境污染问题日益突出，环境内分泌干扰物对生殖健康的影响备受关注。近年来，中国人血清中某些环境雌激素浓度增加了约50多倍，脐带血有机氯农药的检出率高达97.9%。本发明的研究发现，作为化妆品和护肤品防腐剂的三氯生通过与雌激素竞争性结合SULT1E1，抑制SULT1E1的活性，导致E2-S水平降低。由于游离雌激素水平急剧增加易发生高凝状态和激活凝血因子，导致胎盘发生大量的血栓，血-胎盘屏障破坏和胎盘组织坏死，胎儿宫内死亡。由此可见，SULT1E1活性降低可作为自然流产的预警指标。 

乳腺癌与SULT1E1：乳腺癌是妇女常见的恶性肿瘤之一。邓文慧等报道（Chinese Journal of Cancer，2004：23）雌激素刺激乳腺的SULT1E1基因扩增和转录频率增加,易产生基因突变或转录后修饰异常,导致SULT1E1表达下降,增加乳腺细胞的癌变。SULT1E1在肿瘤组织的表达较正常。体内实验发现过表达SULT1E1可以抑制雌激素引起的细胞增殖。SULT1E1能抑制雌激素诱导的肿瘤细胞增殖。章烨等（中华临床医师杂志，2012：13）认为SULT1E1 在75％乳腺癌组织中表达降低对激素依赖型乳腺癌的发生非常重要。由此可见，SULT1E1活性降低可能是乳腺癌变的预警指标。 

子宫内膜癌、子宫肌瘤与SULT1E1：子宫内膜癌是常见的女性生殖道恶性肿瘤之一，近年来其发病率有上升趋势，且发病年龄逐渐年轻化。子宫内膜癌被认为是雌激素依赖性肿瘤，发病与长期大量雌激素刺激有关。姜展红等（中国妇产科临床杂志，2010：11）报道SULT1E1低表达与子宫内膜癌发病密切相关。此外，采用免疫组化染色法检测SULT1El蛋白的表达，结果显示肌瘤组织中SULTIE1蛋白表达低于肌瘤包膜外肌层组织，推断子宫肌瘤的发生、发展与子宫肌瘤组织局部SULT1El水平降低有关。由此可见，SULT1E1的低表达和低活性可作为子宫内膜癌、子宫肌瘤的预警和辅助诊断指标。 

卵巢癌与SULT1E1：卵巢上皮性癌(卵巢癌)的病死率高居妇科恶性肿瘤首位。近年来虽然卵巢癌的诊治手段取得了一定的进展，但其病死率仍无明显改善。近年的研究发现，SULT1E1在卵巢浆液性肿瘤组织中的表达及其临床意义。由此可见，SULT1E1的表达降低可作为卵巢上皮性癌(卵巢癌)的预警和辅助诊断指标。 

上述的研究资料显示，SULT1E1的表达减少和活性降低与自然流产、乳腺癌、子宫内膜癌、卵巢上皮性癌(卵巢癌)发生密切相关，因此检测SULT1E1的表达水平和活性可作为自然流产、乳腺癌、子宫内膜癌、卵巢上皮性癌(卵巢癌)发生的预警和辅助诊断指标，也是雌激素依赖型乳腺癌的甄别指标。