[发明专利]一种PK15细胞制备猪圆环Ⅱ型病毒疫苗的培养基及其使用方法在审
申请号: | 201310361844.4 | 申请日: | 2013-08-13 |
公开(公告)号: | CN103409364A | 公开(公告)日: | 2013-11-27 |
发明(设计)人: | 贾馨丹 | 申请(专利权)人: | 江苏太一生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071;C12N7/02;A61K39/12;A61P31/20 |
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地址: | 214135 江苏省无锡*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 pk15 细胞 制备 圆环 病毒 疫苗 培养基 及其 使用方法 | ||
1.一种大规模高密度培养PK15细胞制备猪圆环II型病毒疫苗的培养基,其特征在于,培养基的组成成分及重量份为:
2.如权利要求1所述的大规模高密度培养PK15细胞制备猪圆环II型病毒疫苗的培养基,其特征在于,上述培养基的组成成分及重量份优选为:
3.如权利要求1或2所述的培养基,在使用前加入1%-2%的胎牛血清或小牛血清,经过膜过滤制成在大规模高密度环境下使用的培养PK15细胞的培养液。
4.一种大规模高密度培养得到PK15细胞接入猪圆环II型病毒后,维持病毒感染时期的培养基,其特征在于,培养基的组成成分及重量份为:
5.如权利要求4所述的培养基,其特征在于,上述培养基的组成成分及重量份优选为:
6.如权利要求4或5所述的培养基,其特征在于,上述培养基还包含如下成分及其重量比例:
7.如权利要求6所述的培养基,其特征在于,上述培养基包含的添加成分,其重量份的优选比例为:
8.一种大规模高密度培养PK15细胞制备猪圆环II型病毒疫苗的培养方法,其特征在于,使用权利要求1-3所述的培养基,在生物反应器中以灌流培养的方式大规模高密度的培养PK15细胞;使用权利要求4-7所述的培养基,接种猪圆环II型病毒种毒液,以灌流培养的方式维持猪圆环II型病毒的增殖,直到收获病毒液。
9.如权利要求8所述的方法,其特征在于,使用本方法所述的培养基和低浓度的血清,在生物反应器中大规模高密度的培养PK15细胞;在接种猪圆环II型病毒后,使用本方法所述的无血清、低蛋白的培养基维持病毒增殖。
10.如权利要求9所述的方法,其特征还在于,适用于制备针对各种猪圆环II型病毒株,各种宿主的猪圆环II型病毒灭活疫苗。
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