[发明专利]人Lp‑PLA2抗原表位肽、抗原、抗体、用途及试剂盒

说明书

技术领域

本发明属于多肽化学和免疫学领域，具体涉及人脂蛋白相关磷脂酶A2（Lp-PLA2）抗原表位肽、用该抗原表位肽制备的Lp-PLA2特异性抗原和相应的单克隆抗体或多克隆抗体、所述抗体在制备人Lp-PLA2体外诊断试剂盒上的用途，人Lp-PLA2体外诊断试剂盒，以及一种用于定量检测待测物中人Lp-PLA2蛋白的荧光免疫层析试纸及其制备方法。

背景技术

心脑血管疾病一直被公认为是危害人类健康的最大杀手之一，也是全球范围内造成死亡的最主要原因。我国每年死于心脑血管疾病的人数高达300万以上，现有患者超过6000万人。近年来，随着居民生活水平的不断提高，自然环境的不断恶化，各种人群的心脑血管疾病的患病率、发病率和死亡率都呈逐年上升的趋势。尤其是中老年人的发病率高达62%，因此预防治疗心脑血管疾病已经变得刻不容缓，它不仅关系到广大人民群众的健康生活问题，在一定程度上还影响着整个国家国民素质的整体情况。

心脑血管疾病的病理基础是动脉粥样硬化。近年来，研究发现动脉粥样硬化是一种炎性反应性疾病，炎性细胞及其释放的产物被认为是最主要的促动脉粥样硬化的因素。在粥样斑块形成、进展和最终破裂的过程中均有炎性反应介质的参与。

因此，寻找一种能够反应这种动态变化过程的介质尤为重要，目前国际上已经发现了一种新的炎性反应标志物，即脂蛋白相关磷脂酶A2（Lipoprotein-Associated Phospholipase A2，Lp-PLA2)。

脂蛋白相关磷脂酶A2，英文简写Lp-PLA2，属于磷脂酶A2家族，主要由炎症细胞（如巨噬细胞和淋巴细胞）分泌。Lp-PLA2是由441个氨基酸组成的蛋白质，分子量为45KDa。Lp-PLA2具有降解血小板活化因子的活性，又称为血小板活化因子乙酰水解酶（PAF-AH）。80%的Lp-PLA2与低密度脂蛋白（LDL）结合，能水解低密度脂蛋白上的氧化卵磷脂，生成溶血卵磷脂和氧化型游离脂肪酸，后二者是促炎物质，因此Lp-PLA2具有促炎症和促动脉粥样硬化形成的作用。

当动脉粥样硬化的炎症发展到严重程度时，Lp-PLA2将会被大量释放入血液中，致使其血液内的水平大幅增高，因此Lp-PLA2在血液中的浓度能够反映动脉粥样斑块的炎症程度。

因此，通过检测血液中的Lp-PLA2，可以有效地了解动脉粥样硬化斑块的炎症程度及其稳定性。这样就可预警心肌梗死和脑血栓的发生，对预防心脑血管突发事件具有相当重要的意义。

检测Lp-PLA2最理想的方法是免疫测定。因此，寻找合适的具有免疫原性的Lp-PLA2抗原表位肽、制备特异性的Lp-PLA2抗原及抗体即成为了重点。

发明内容

为解决上述现有技术中所存在的问题，本发明提供了一种人Lp-PLA2抗原表位肽，用该抗原表位肽制备的Lp-PLA2特异性抗原和相应的单克隆抗体或多克隆抗体，其在制备人Lp-PLA2体外诊断试剂盒上的用途，以及人Lp-PLA2体外诊断试剂盒。

具体而言，本发明提供了：

一种人Lp-PLA2抗原表位肽，其中所述Lp-PLA2抗原表位肽的氨基酸序列为如下两者之一：

(1)Thr-Lys-Ile-Pro-Arg-Gly-Asn-Gly-Pro-Arg-Ser-Lys-Glu-Ser-Tyr；

(2)Tyr-Lys-Gly-Asp-Ile-Asp-Ser-Asn-Val-Ala-Ile-Asp-Leu-Ser-Asn。

本发明还提供了一种Lp-PLA2抗原，其是通过使所述的人Lp-PLA2抗原表位肽(1)与载体蛋白偶联制备而成的。

本发明还提供了一种Lp-PLA2抗原，其是通过使所述的人Lp-PLA2抗原表位肽(2)与载体蛋白偶联制备而成的。

本发明还提供了一种人Lp-PLA2抗体，其是由所述的Lp-PLA2抗原制备而成的单克隆抗体或多克隆抗体，其中所述Lp-PLA2抗原是通过使所述的人Lp-PLA2抗原表位肽(1)与载体蛋白偶联制备而成的。

本发明还提供了一种人Lp-PLA2抗体，其是由所述的Lp-PLA2抗原制备而成的单克隆抗体或多克隆抗体，其中所述Lp-PLA2抗原是通过使所述的人Lp-PLA2抗原表位肽(2)与载体蛋白偶联制备而成的。

本发明还提供了根据所述的人Lp-PLA2抗体在制备人Lp-PLA2体外诊断试剂盒上的用途。

本发明还提供了一种人Lp-PLA2体外诊断试剂盒，其包含所述的人Lp-PLA2抗体作为包被抗体，其中所述包被抗体优选为单克隆抗体。