[发明专利]一种抗人ErbB2抗体—美登木素偶联物及其应用

说明书

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种抗人ErbB2抗体与美登木素偶联物及其在医药方面的应用。

背景技术

ErbB族受体酪氨酸激酶是细胞生长、分化和存活的重要介质。该家族包括4个不同的成员：商品生长因子受体（EGFR或ErbB1），Her2（ErbB2），Her3（ErbB3）和Her4（ErbB4）。

Hudziak等在分子细胞生物学9（3）：1165-1172（1989）中描述了一组抗ErbB2抗体的产生，这种方法的特征在于使用人乳腺癌细胞SK-BR-3.在SK-BR-3细胞与抗体接触72小时后，通过细胞单层结晶紫染色测定了细胞的相对增值率。用该试验，最多一只来自被称为4D5的抗体，该抗体可以一直56%的细胞增殖。通过对该抗体的人源化改造获得了曲妥珠单抗（Trastuzumab），临床上用抗ErbB2抗体曲妥珠单抗治疗ErbB2高表达的乳腺癌。临床试验中，曲妥珠单抗对15%的具有2+以上水平的乳腺癌患者产生了临床反应，反应持续中值为9.1个月。（Cobleigh等，临床肿瘤学杂志1996，14:737-744）。1998年9月25日，曲妥珠单抗（商品名Herceptin）被美国食品与药品管理委员会批准上市用于治疗过量表达ErbB2蛋白的恶性乳腺癌患者。曲妥珠单抗虽然挽救了许多乳腺癌患者或延长了患者的生存期。然而，曲妥珠单抗仅对ErbB2高表达的患者才有效果，且临床反应率仅有15%，还需要有更多的患者需要更佳的治疗药物。

为了提高治疗指数，目前将曲妥珠单抗与美登木素偶联，制成trastuzumab emtansine（T-DM1，Kadcyla），用于先前使用曲妥珠单抗、其它抗-HER2治疗药物及常用的乳腺癌治疗一线化疗药物紫杉烷类治疗无效的患者。T-DM1输送药物至肿瘤部位，可以缩小肿瘤，减慢疾病进展并延长生存期。该药物现已成为FDA批准的第四个以HER2蛋白为靶点的药物。通过临床试验，T-DM1的安全性和有效性得到了评价，在该项991名患者参与的临床试验中，患者被随机配给T-DM1，或者配给拉帕替尼加另一种化疗药物卡培他滨。试验中，患者要么在癌症进展以后接受治疗，要么在副作用无法忍受的情况下接受治疗。该临床研究的目的是检测患者的无进展生存期和总生存期。研究结果显示，Kadcyla治疗患者中位无进展生存期为9.6个月，而拉帕替尼+卡培他滨治疗患者中位无进展生存期为6.4个月。Kadcyla治疗组中位总生存期为30.9个月，而拉帕替尼+卡培他滨治疗组中位总生存期为25.1个月。T-DM1在批准时有一项黑框警告，提醒患者与卫生保健专业人员该药物可导致肝毒性，心脏毒性和死亡。这主要是脱落的DM1以及T-DM1进入体内降解释放出的含DM1小分子引起的，因此有必要在保持偶联药物的活性的基础上降低偶联药物中DM1的比例。

T-DM1的制备方法中利用曲妥珠单抗上的赖氨酸的侧链氨基与SMCC偶联然后再与美登木素DM1偶联，每分子曲妥珠单抗上偶联的DM1分子平均为3.5个。曲妥珠单抗上具有88个赖氨酸位点，因此，实际的T-DM1为曲妥珠单抗偶联了不同数目DM1和多种偶联位点的偶联物组合，然而，每种组分的药效、药代动力学属性和安全性都各有不同。通常情况，载药量高的抗体具有更强的体外生物活性，然而，载药量的提高也会带来多聚体成分增加、稳定性下降、毒性增加、免疫原性高、体内清除速度快、半衰期短而实际治疗指数并不高等诸多问题。此外，抗体互补决定簇（complementarity－determining regions，CDR）或其附近的赖氨酸被偶联也会影响抗体与抗原的结合，从而降低了该偶联物的药效。

发明内容

本发明的目的在于提供一种抗人ErbB2抗体与美登木素偶联物，该偶联物在保持偶联药物活性的基础上降低了偶联药物中美登木素（DM1）的比例，进而降低了该偶联药物的毒副作用。

本发明的另一目的在于提供该抗人ErbB2抗体与美登木素偶联物在制备抗肿瘤药物中的应用。

本发明意在降低曲妥珠抗体与DM1偶联过程对ErbB2抗原结合的影响，并提高曲妥珠单抗偶联美登木素DM1产品的均质性。