[发明专利]鉴别马立克氏病病毒血清1型疫苗毒的引物及试剂盒有效
申请号: | 201310014600.9 | 申请日: | 2013-01-15 |
公开(公告)号: | CN103131795A | 公开(公告)日: | 2013-06-05 |
发明(设计)人: | 龙进学;张坦;孙丰廷;郑杰;张红;杨国良;王亚丽;张凌云 | 申请(专利权)人: | 北京华都诗华生物制品有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/93 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王朋飞;张庆敏 |
地址: | 102600 北京市大*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 鉴别 马立克氏病 病毒 血清 疫苗 引物 试剂盒 | ||
1.一种用于鉴别马立克氏病病毒血清1型疫苗毒的引物,其特征在于,其包括SEQ ID NO.1~2所示的核苷酸序列。
2.权利要求1所述的引物在鉴别马立克氏病病毒血清1型疫苗毒中的应用。
3.含有权利要求1所述引物的鉴别马立克氏病病毒血清1型疫苗毒的试剂盒。
4.如权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,采用权利要求1所述引物进行PCR扩增后,有目的条带扩增的样品为马立克氏病病毒血清1型疫苗毒阳性,否则为阴性。
5.如权利要求3或4所述的试剂盒,其特征在于,采用权利要求1所述引物进行PCR扩增后,只具有长度为250bp的扩增产物条带的样品为马立克氏病病毒血清1型疫苗毒CVI988株,具有长度为250bp和750bp两条特异产物条带的样品为马立克氏病病毒血清1型疫苗毒814株。
6.如权利要求3或4所述的试剂盒,其特征在于,PCR反应条件为:95℃3min;94℃变性30sec,60℃退火30sec,72℃1min,循环40次;72℃10min。
7.一种鉴别马立克氏病血清1型疫苗毒株的诊断试剂,其特征在于,包括权利要求1所述的引物。
8.如权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,还包括一对核苷酸序列如SEQ ID NO.3~4所示的引物。
9.如权利要求8所述的试剂盒,其特征在于,其工作程序为:
1)对样品DNA应用SEQ ID NO.3~4所示的引物进行一次PCR反应,具有长度为277bp的扩增产物条带的样品为马立克氏病病毒阳性,否则为阴性;
2)对步骤1)阳性的样品DNA应用权利要求1所述的引物再次进行PCR反应,只具有长度为250bp的扩增产物条带的样品为马立克氏病病毒血清1型疫苗毒CVI988株,具有长度为250bp和750bp两条特异产物条带的样品为马立克氏病病毒血清1型疫苗毒814株。
10.如权利要求9所述的试剂盒,其特征在于,步骤1)中PCR反应条件为:94℃3min;94℃变性30sec,55℃退火30sec,72℃30s,循环35次;72℃10min。
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