[发明专利]一种果蔬中农药残留毒性的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及食品安全领域，尤其涉及一种果蔬中农药残留毒性的检测方法。

背景技术

目前蔬菜和水果的农药残留检测一般采用气相色谱法、液相色谱法和气相色谱/质谱法等，使用实验室的色谱分析仪，分析工作需要专业的人员完成。农药残留毒性的检测，目前一般采用分光光度法，这种方法操作起来比较复杂，从采样、样品的处理得到分析结果往往需要数小时，甚至一两天时间，而且分光光度计结构复杂，无法适用于现场快速的定性检测。发光细菌是一类在正常的生理条件下能够发射可见荧光的细菌，发光细菌与外来受试物接触后，由于毒物具有抑光作用，发光细菌的发光强度即有所变化，变化的程度与受试物的毒性大小呈相关关系，发光强度的变化可以用发光光度计测出。但青海弧菌Q67菌株的稳定发光时间有限，在一定程度上影响果蔬中农药残留毒性的检测。

发明内容

针对上述技术问题，本发明设计开发了一种果蔬中农药残留毒性的检测方法，目的在于缩短果蔬中农药残留毒性的检测时间，延长青海弧菌Q67菌株的稳定发光时间，提高检测准确度。

本发明提供的技术方案为：

一种果蔬中农药残留毒性的检测方法，包括以下步骤：

步骤一、NaCl 2.48～4.06g，NaH₂PO₄ 0.07～0.25g，MgSO₄·7H₂O 0.13～0.32g，MgCl₂·6H₂O 0.29～0.40g，CaCl₂ 0.03～0.16g，NaHCO₃ 2.27～4.19g，MgCO₃0.34～0.62g，MgBr₂ 0.01～0.23g，KCl 0.01～0.05g，酵母膏3～6g，胰蛋白胨3～6g，琼脂18～25g，甘油2～7g，溶于1000mL蒸馏水中，调整pH 4～5，制成第一代斜面培养基，121℃灭菌20min，第二代斜面培养基除第一代斜面培养基的相同成分外，再加入Na₂HPO₄ 0.07～0.25g，调整pH 8～9，121℃灭菌20min；

步骤二、将青海弧菌Q67菌株的菌种移接到上述第一代斜面培养基上，15～25℃下培养12～18h，用生理盐水将菌苔从第一代斜面培养基上冲刷下来，转接到第二代斜面培养基上，相同条件培养，得到测试用菌液；

步骤三、将待测果蔬捣碎成汁，加入蒸馏水并搅拌均匀，取其中10mL作为待测样品，对照选用国家质量体系认证的无农药全天然果蔬，同样方法处理，取其中10mL作为对照样品；

步骤四、分别取待测样品和对照样品1mL置于两个小杯中，同时加入1mL浓度为1.2％～1.8％的NaNO₃溶液，再加入0.1mL步骤二中制得的待试用菌液，放置30min，用发光检测仪测定每杯的发光强度，按下式计算相对发光强度

相对发光强度＝待测样品发光强度/对照样品发光强度

若相对发光强度在90％～110％之间，则待测样品的农药残留毒性为安全；若相对发光强度为110％以上或在80％～90％之间，则待测样品的农药残留毒性为可疑；若相对发光强度为80％以下，则待测样品的农药残留毒性为不安全。

优选的是，所述的果蔬中农药残留毒性的检测方法中，所述步骤一第一代斜面培养基中NaH₂PO₄溶液调整第一代斜面培养基的pH为4.5，第二代斜面培养基中NaH₂PO₄溶液和Na₂HPO₄溶液组成的缓冲溶液调整第二代斜面培养基的pH为8.5。

优选的是，所述的果蔬中农药残留毒性的检测方法中，所述步骤二中青海弧菌Q67菌株的菌种在两代斜面培养基上均于20℃下培养16h。

优选的是，所述的果蔬中农药残留毒性的检测方法中，所述步骤四中NaNO₃溶液的浓度为1.5％。

优选的是，所述的果蔬中农药残留毒性的检测方法中，所述步骤二中的生理盐水为浓度为0.85％的NaCl溶液。