[发明专利]一种用于何首乌及其中药制剂肝毒性评价的生物毒性效价检定方法有效

专利信息
申请号: 201310276998.3 申请日: 2013-07-03
公开(公告)号: CN103352069A 公开(公告)日: 2013-10-16
发明(设计)人: 肖小河;王伽伯;吕旸;赵艳玲;马致洁;鄢丹;李娜 申请(专利权)人: 中国人民解放军第三〇二医院
主分类号: C12Q1/02 分类号: C12Q1/02
代理公司: 北京安信方达知识产权代理有限公司 11262 代理人: 苏蕾;高瑜
地址: 100039 北*** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明提供一种用于评估何首乌及其中药制剂肝毒性的生物毒性效价检定方法。所述毒性效价生物检定法可以准确、快捷地检测何首乌的整体毒性,对药材进行统一的毒性效价标示。在药材生产、加工、销售等环节,毒性效价检测可以作为药材质量控制的手段之一。在临床上,医生可以根据药材的标示毒性效价调整用药剂量,从而保证用药安全。
搜索关键词: 一种 用于 何首乌 及其 中药 制剂 毒性 评价 生物 检定 方法
【主权项】:
一种用于评估何首乌及其中药制剂肝毒性的生物毒性效价检定方法,所述生物毒性效价检定方法包括下述步骤:a.配制供试品溶液和供试品稀释液制备何首乌或其固体制剂的干浸膏;在测定前,用细胞培养液将所述干浸膏配置成供试品溶液,过滤除菌,备用;测定时,估计供试品毒性效价,用所述细胞培养液稀释所述供试品溶液,得到不同浓度的供试品稀释液;其中所述干浸膏如下制备:称取何首乌或其固体制剂形式的供试品粉末,用乙醇浸泡,超声处理,过滤,得到的滤液减压浓缩,真空干燥,制得干浸膏;b.配制对照品溶液和对照品稀释液用所述细胞培养液将具有肝细胞毒性的对照品配制成对照品溶液,过滤除菌,贮存,备用;测定时,用所述细胞培养液稀释所述对照品溶液,得到不同浓度的对照品稀释液;c.测定以肝细胞作为供试细胞,将所述肝细胞接种于细胞培养板中,并在培养箱内培养12~48小时,吸出细胞培养液,加入所述对照品稀释液或所述供试品稀释液,放入培养箱内孵育,之后吸出培养板内的所述对照品稀释液或供试品稀释液,计算细胞抑制率;d.生物毒性效价计算对细胞抑制率进行数据转换,并将转换结果作为评价指标,按照中国药典2010版二部附录XIV生物检定统计法中的量反应平行线二剂量法计 算毒性效价及实验误差,可信限率FL%不超过40%;其中,优选地采用三次方对细胞抑制率进行数据转换;优选地,可信限率FL%不超过20%;其中,所述细胞培养液是在常规方法中用于培养肝细胞的细胞培养液。
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