[发明专利]拮抗抑制血管内皮细胞生长因子与其受体结合的单克隆抗体及其编码序列与用途

说明书

技术领域

本发明属于生物技术单克隆抗体领域。本发明涉及一种可拮抗抑制血管内皮细胞生长因子（VEGF）与其受体（即VEGF-R）结合的单克隆抗体及其用途。 

背景技术

血管新生或增生(angiogenesis)在生物学上是指体内的已存在的血管(如毛细血管和微小动、静脉)通过出芽或分裂的方式而产生新的血管的过程。血管新生在维持机体的许多正常的生理过程如组织胚胎发育、外伤伤口的癒合与修复等是有益的和必需的。但过度的血管新生或增生也与许多病理变化（如肿瘤的增生扩散、炎症等）息息相关。体内的血管能够不断地增生与增长的关键是其内衬的血管内皮细胞具有不断分裂增生及定向迁移置入已有的血管管壁的能力。血管内皮细胞生长因子(vascular endothelialgrowth factor,VEGF)则是已知的最重要及最强烈的促血管内皮细胞分裂增生及血管增长的因子。VEGF在血管增生中的重要性已在VEGF基因剔除小鼠的研究中被充分证实：因为只要当VEGF基因中的一份被敲除后，小鼠胚胎在仅发育至11至12天时就会因血管增生受阻及异常而死亡(Carmeliet P等Nature 1996,380:435;Ferrara N等Nature 1996，380:439)。 

VEGF在多种恶性肿瘤组织中（如结直肠癌、胃癌、卵巢癌、乳腺癌、肝癌、多发性骨髓瘤等）呈过度表达，且其表达水平高低与肿瘤生长与转移复发程度呈高度正相关(Dvorak HF等：J Exp Med1991;174:1275-8；Brown LF等Cancer Res 1993;53:4727-35；Weidner N,Semple JP,Welch WR及Folkman J:N Engl J Med 1991；324:1-8.4-5)。近年来国内外一系列动物试验及临床实践已证明：通过基因调控或给予外来药物来阻断体内VEGF及其受体（VEGF-R）介导的促血管增生，则可导致肿瘤组织因缺血而坏死，从而达到抑制肿瘤生长和转移及延长患者生存期的良好疗效。因此,以VEGF及其受体为靶点的抗肿瘤血管增生药物已成为当今国内外药物研发竞争热点。 

在以VEGF及其受体为靶点的抗肿瘤血管增生药物的开发上，目前主要有两大模式： 

模式一是研制拮抗VEGF受体（VEGF-R）中位于细胞膜内的酪氨酸蛋白激酶活性的抑制剂，这类拮抗抑制剂一般都属于小分子化学类药，其中的代表性药物为2006年由美国Pfizer(辉瑞)开发上市的Sutent(舒尼替尼);及由德国Bayer(拜耳)与美国Onyx Pharmaceuticals开发上市的Nexavar。 

模式二是研制可直接阻断VEGF与其受体（VEGF-R）结合的抗体或抗体Fc融合蛋白等大分子蛋白类生物制剂。该类代表性药物为由Roche/Genentech公司研发生产并于2004年2月获美国FDA批准上市的人源化抗VEGF单克隆抗体药Bevacizumab（贝伐单抗）,商品名Avastin（阿瓦斯丁)。Avastin是目前为 止全球市场上唯一的一个抗VEGF单克隆抗体药物。Avastin通过与体内VEGF的高度特异结合,从而阻止VEGF与其受体的结合，进而达到阻断血管增生与抑制肿瘤增生的疗效（Presta LG等Cancer Res，1997，57:4593;Hurwitz H等N Engl J Med，2004;350:2335）。Avastin目前已获美国FDA批准用于治疗转移性结肠癌(metastatic colorectal cancer,mCRC)、晚期肺癌(advanced non-squamous non–small celllung cancer,NSCLC)、脑胶质瘤(glioblastoma)、转移性肾癌(metastatic kidney cancer，mRCC)等多种实体瘤。Avastin 2010年2月获中国SFDA批准用于治疗结肠癌。