[发明专利]拮抗抑制血管内皮细胞生长因子与其受体结合的单克隆抗体及其编码序列与用途

权利要求书

1.一种拮抗抑制血管内皮生长因子与其受体结合的鼠源单克隆抗体，其特征在于，所述抗体的轻链可变区具有SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列，重链可变区具有SEQ ID NO：2的氨基酸序列。

2.一种编码权利要求1所述抗体的DNA分子或基因，其特征在于，其轻链可变区具有SEQ ID NO：3所示的核苷酸序列，重链可变区具有SEQ ID NO：4的核苷酸序列。

3.一种拮抗抑制血管内皮生长因子与其受体结合的人源化单克隆抗体，其特征在于，将权利要求1所述的重链可变区和轻链可变区基因进行人源化改造，包括框架区和抗原结合区域/互补决定区的氨基酸置换；所述人源化单克隆抗体的轻链可变区具有SEQ ID NO:5所示的氨基酸序列，重链可变区具有SEQ ID NO:6所示的氨基酸序列。

4.一种编码权利要求3所述人源化单克隆抗体的DNA分子或基因，其特征在于，其轻链可变区具有SEQ ID NO：7所示的核苷酸序列，重链可变区具有SEQ ID NO：8的核苷酸序列。

5.一种如权利要求3所述的人源化单克隆抗体的衍生体，其特征在于，所述衍生体的轻链抗原互补决定区具有SEQ ID NO：9，SEQ ID NO：10及SEQ ID NO：11的氨基酸序列；其重链抗原互补决定区具有SEQ ID NO：12，SEQ ID NO：13及SEQ ID NO：14的氨基酸序列。

6.一种表达载体，其特征在于，它含有权利要求4所述的DNA分子序列以及与该序列操作性相连的表达调控序列。

7.一种重组宿主细胞，其特征在于，它由权利要求6所述的表达载体转化而成。

8.根据权利要求7所述的重组宿主细胞或其子代细胞，其中所述重组宿主细胞或其子代细胞表达权利要求3的人源化单克隆抗体。

9.一种药物组合物，其特征在于，它含有药学上有效量的权利要求3所述的人源化单克隆抗体或权利要求5所述的人源化单克隆抗体的衍生体以及药学上可接受的载体。

10.权利要求9所述的药物组合物在制备治疗与血管增生相关的疾病的药物制剂中的应用。

11.如权利要求10所述的应用，其特征在于，所述疾病包括结肠癌、乳腺癌、横纹肌肉瘤。

12.一种制备权利要求3所述的人源化单克隆抗体的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：

a)提供一表达载体，该表达载体含有权利要求4所述的DNA分子序列以及与该序列操作性相连的表达调控序列；

b)用步骤a）所述的表达载体转化宿主细胞；

c)在适合所述人源化单克隆抗体表达的条件下培养步骤b)所得的宿主细胞：和

d)采用亲合层析从宿主细胞培养液中分离纯化获得所述人源化单克隆抗体。