[发明专利]一种丹酚酸A制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种丹酚酸A制备方法。

技术背景

丹参制剂是我国心脑血管疾病的基本治疗药物，因疗效确切，丹参已成为我国用量最大、销售额最高、制剂生产厂最多，临床剂型最全的中药之一。丹参有效化学成分主要有两大类：脂溶性丹参酮类化合物和水溶性酚酸类化合物。研究表明：丹酚酸类在抗肝脏损伤、抗动脉粥样硬化及细胞凋亡以及改善记忆功能障碍等方面有着显著的活性。其中又以丹酚酸A(Salvianolic acid A)抗氧化活性最强，丹酚酸A结构如下：

但是，丹酚酸A的天然含量极低(约为丹参药材的0.01-0.06％)，使得原药材成本过高，分离纯化难度过大，严重制约着药物的开发和研究，成为其产业化的瓶颈。现有技术中，也一自努力尝试找到一种适于实际生产应用的提取制备丹酚酸A的生产工艺。例如，中国专利CN101041620A公开了采用水温浸、离心、树脂层析、萃取、浓缩干燥制备丹酚酸A的方法，但其最终提取物得率为3％0，产率低，生产成本高。又如，中国专利CN101121658A公开了水提取、高温高压反应、树脂层析、萃取、真空干燥或冷冻干燥制备丹酚酸A的方法。而中国专利CN101480423A公开了用乙醇/水洗脱大孔树脂所得的丹酚酸A溶液，干燥(优选减压干燥或真空干燥)，得到丹酚酸A提取物最高含量为91.26％的方法。但以上专利文献中对丹酚酸A的破坏很大。成本极高，有机残留严重，极不易保存与使用。

综上所述，上述现有技术均存在实际生产过程中无法克服的缺陷。

发明内容

为克服上述缺陷，本发明提供了一种丹参丹酚酸A制备方法。

本发明提供的一种丹参丹酚酸A制备方法，以丹参为原料，制备方法如下：

取丹参药材，切成饮片或粉碎成直径约1mm～5mm颗粒，每次加3～15倍量、45～95℃水温浸提取，同时以10～50转/分速度搅拌，或加3～15倍量水煎煮提取，共提取1～3次，每次提取1～4小时；提取液减压浓缩至相对密度1.0～1.25(60℃)，加入乙醇使含醇量在50％～85％，静置，滤过，滤液减压回收乙醇并浓缩至无醇味，得丹参提取液；或者

取丹参药材，切成饮片或粉碎成直径约1mm～5mm颗粒，每次加3～15倍量30％～60％乙醇回流提取，每次提取1～4小时，共提取1～3次；减压回收乙醇并浓缩至无醇味，得丹参提取液；

将上述丹参提取液加水稀释至每1ml含丹酚酸B1～30mg，水溶液用碱调pH至3.5～6.5，加入与丹酚酸B摩尔百分比0.1～3％的氯化锌作为催化剂，在100～140℃温度加热转化1～6小时；

转化液调pH值至2.5～4.5，静置、离心，上清液减压浓缩至每1ml含丹酚酸A1～10mg，经HPD-100大孔树脂柱层析分离，丹酚酸A上样量与大孔吸附树脂比为1∶35～1∶70，树脂柱径高比为1∶4～1∶30，分别用1～8倍柱体积水、1～10倍柱体积10％～40％乙醇洗脱，除去杂质，再用2～10倍柱体积20％～60％乙醇洗脱，HPLC检测，收集含有丹酚酸A的20％～60％乙醇洗脱部分，减压回收乙醇并浓缩至无醇味；

水溶液浓缩至每1ml含1-10mg丹酚酸A的溶液，通过聚酰胺层析柱分离，丹酚酸A上样量与聚酰胺比为1∶5～1∶25，树脂柱径高比为1∶4～1∶25，分别用1～10倍柱体积水、5～20倍柱体积20％～60％乙醇溶液洗脱除杂，再用4～15倍柱体积40％～90％乙醇溶液洗脱，收集含有丹酚酸A的40％～90％乙醇溶液部分，减压回收乙醇并浓缩至无醇味水溶液；

水溶液浓缩，调酸pH至2.0～4.0，用水溶液1～8倍量的叔丁基甲基醚，分2～6次萃取，分离有机层，减压回收叔丁基甲基醚，制成每1ml含丹酚酸A1g～10g的萃取液，加入1～3倍量硅胶，搅拌，挥干；

把搅拌样硅胶加到已装好的5～20倍量干硅胶柱上，硅胶柱径高比为1∶4～1∶25，以正戊烷-叔丁基甲基醚为洗脱剂，梯度洗脱，分别用正戊烷-叔丁基甲基醚(4∶6)洗脱6～30倍柱体积，正戊烷-叔丁基甲基醚(6∶4)洗脱6～30倍柱体积，减压回收洗脱剂，回收后的丹酚酸A加5～20倍量水溶解，微波真空干燥，得丹酚酸A。

优选的，制备方法如下：