[发明专利]一种纳米佐剂及含有该纳米佐剂的流感病毒疫苗及制备方法

说明书

  

技术领域   

本发明涉及一种纳米佐剂及流感病毒疫苗，具体涉及一种纳米佐剂及含有该纳米佐剂的流感病毒疫苗及制备方法，属于生物技术领域。

技术背景

流行性感冒感传染性极强（主要通过飞沫或人与人密切接触传播），而且流行、变异极快，同时极易引起多种并发症，而导致死亡。流感分为季节性流感和大流行流感，季节性流感多发于冬季，由于季节性流感病毒大多存在于人群中，对人体免疫系统而言，其危害性相对较小。但当流感病毒突变或者跨越物种而从其他动物感染给人类，则容易造成大流行流感。目前防止流感最有效的手段就是接种流感疫苗。但面对大流行的暴发，要在短时间内提供足够多的疫苗免疫易感人群，目前尚无法做到。 

    佐剂属于抗原辅助剂，能够与疫苗共同使用而明显提高疫苗的免疫效果。由于流感疫苗的生产在时间上属于后延性，一旦大流行流感暴发，难于在短时间内大量生产出急需的疫苗量。但当辅以较好的佐剂时，则可在增强流感疫苗免疫效果的同时，有效减少流感疫苗的用量，让更多的易感人群能够接种疫苗，以应对大流行流感的暴发。就常规的疫苗佐剂而言，目前已经应用于流感疫苗的佐剂有：铝佐剂、MF59、LTK63等。铝佐剂可以增强初次免疫，减少每次免疫抗原的用量以及免疫次数，但是对于嗣后加强免疫效果较小，且可能发生多种不良反应。其余的MF59、LTK63，虽不良反应较少，但对疫苗免疫原性的增强作用不明显。 

目前将粒径小于100nm的乳剂称为纳米乳剂，它由油相-水相-乳化剂-助乳化剂组成，连续相为水相、分散相为油相的纳米乳剂为O/W型，连续相为油相、分散相为水相的纳米乳剂为W/O型。纳米乳剂具有粒径小且均匀，易于制备，稳定性、流动性均较好，易于注射等特点，可作为药物载体应用于多种吸收方式的药物制剂中。 

发明内容

为克服现有疫苗佐剂，尤其是流感疫苗铝佐剂存在的不良反应，MF59、LTK63等佐剂对疫苗免疫原性的增强作用不明显等不足，本发明提供一种纳米佐剂，还提供含有该纳米佐剂的流感病毒疫苗及制备方法，可以极大增强疫苗免疫效果，降低不良反应，减少每剂流感疫苗的使用量，满足大流行流感暴发期的用量。 

本发明提供的是这样一种纳米佐剂，由下列质量比的组分组成： 

油相                        10～50%

乳化剂                      20～50%

助乳化剂                    20～50%。

所述油相为市购的棉子油或注射用无水羊毛脂。 

所述乳化剂为市购的豆磷脂或卵磷脂。 

所述助乳化剂为市购的海藻酸钠或单硬脂酸甘油酯。 

本发明提供的纳米佐剂经过下列方法制备： 

A、按下列质量比备料：

油相                        10～50%

乳化剂                      20～50%

助乳化剂                    20～50%；

B、将步骤A的乳化剂、助乳化剂和油相混合后，在20～60℃温度下，按50-500转/分钟的转速，搅拌均匀，得纳米佐剂。

本发明提供的是这样一种含有纳米佐剂的流感病毒疫苗，由下列质量比的组分组成： 

血凝素含量为15～180μg/株.ml的流感病毒疫苗  10～30%

油相                                        10～50%

乳化剂                                      20～50%

助乳化剂                                    20～50%。

所述稀释流感病毒疫苗为将流感病毒疫苗原液或半成品或成品的用注射用水稀释到血凝素含量为15～180μg/株.ml的流感病毒疫苗。 

所述流感病毒疫苗原液是用世界卫生组织（WHO）提供的毒种所制备的公知公用产品。 

本发明提供的含有纳米佐剂的流感病毒疫苗，经过下列步骤制备： 

A、按下列质量比备料：

血凝素含量为15～180μg/株.ml的流感病毒疫苗  10～30%